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目的：
检测人RUNT相关转录因子3(human runt-related transcriptionfactor-3,RUNX3)及细胞核相关抗原(nuclear-associated antigen,Ki-67)mRNA、蛋白在正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤变(CIN)、宫颈癌中的表达,探讨其表达与宫颈癌临床病理参数的关系,及两者的相关性,以了解RUNX3和Ki-67的表达在宫颈癌发生发展中的作用。
方法：
1.采用免疫组化方法检测25例正常宫颈、34例CIN、48例宫颈癌组织中RUNX3、Ki-67蛋白的表达,应用SYBR GreenⅠ嵌合荧光Real-Time PCR技术检测10例正常宫颈、24例CIN、30例宫颈癌组织中RUNX3、Ki-67mRNA的表达。
2.分析RUNX3、Ki-67的表达与宫颈癌临床病理特征之间的关系。
3.分析RUNX3、Ki-67在宫颈癌中表达的相关性。
结果：
1.RUNX3蛋白阳性表达主要定位于细胞浆,呈棕黄色染色。RUNX3蛋白在正常宫颈、CINⅠ、CINⅡ-Ⅲ、宫颈癌中阳性表达率分别为96％、80％、52.6％、29.2％,呈现递减趋势,四组比较差异有统计学意义(P＜0.05)。RUNX3 mRNA在正常宫颈、CINⅠ、CINⅡ-Ⅲ、宫颈癌组织中的相对表达值分别为0.035±0.007、0.024±0.004、0.018±0.004、0.008±0.005,呈现递减趋势,四组比较差异有统计学意义(P＜0.05)。
2.Ki-67蛋白阳性表达主要定位于细胞核,呈棕黄色染色。Ki-67蛋白在正常宫颈、CINⅠ、CINⅡ-Ⅲ、宫颈癌组织中阳性表达率分别为12.0％、40.0％、68.4％、83.3％,呈现递增趋势,四组比较差异有统计学意义(P＜0.05)。Ki-67 mRNA在正常宫颈、CINⅠ、CINⅡ-Ⅲ、宫颈癌组织中相对表达值分别为0.013±0.009、0.049±0.029、0.079±0.030、0.110±0.008,呈现递增趋势,四组比较差异有统计学意义(P＜0.05)。
3.RUNX3蛋白、mRNA在宫颈癌高中分化组、Ⅰ期组和无淋巴结转移组中的表达显著高于低分化组、Ⅱ期组和有淋巴结转移组(P＜0.05)。RUNX3蛋白、mRNA在宫颈癌中的表达与年龄,组织学类型和高危型HPV感染无显著相关(P＞0.05)。
4.Ki-67蛋白、mRNA在宫颈癌低分化组、有淋巴结转移组和高危型HPV阳性组中的表达显著高于高中分化组、无淋巴结转移组和高危型HPV阴性组(P＜0.05)。Ki-67蛋白、mRNA在宫颈癌中的表达与年龄,组织学类型和临床分期无显著相关(P＞0.05)。
5.在宫颈癌中Runx3、Ki-67蛋白和mRNA的表达呈负相关(Spearman相关性检验r=-0.451,P=0.001＜0.05;Pearson相关性检验r=-0.415,P=-0.023＜0.05)。
结论：
1.Runx3基因的mRNA和蛋白在宫颈癌组织中存在明显的表达缺失或下调,并且与组织分化程度、临床分期、淋巴结转移有关,提示Runx3可能作为一抑癌基因参与了宫颈癌的发生,并且可能与肿瘤恶性程度、侵袭转移有关。
2.Ki-67可作为反映宫颈癌细胞增殖能力的指标,且与高危型HPV有关。
3.在宫颈癌中Runx3与Ki-67的表达之间存在负相关性,Runx3表达的缺失或减少可能增加了肿瘤细胞的增殖活性。