基于能量代谢探讨红景清肺方对PM2.5诱导小鼠急性肺损伤的保护作用研究

来源 :长春中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:daihongjun2
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目的:探究红景清肺方对给予PM 2.5染毒的小鼠急性肺损伤的保护作用,观察各组小鼠肺组织病理形态学改变,肺组织匀浆中IL-1β、i NOS、Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶及ATP的含量变化,肺组织中AMPK、PGC-1α、Nrf1、TFAM、Bcl-2及Bax蛋白的表达量,以探讨红景清肺方对PM 2.5导致急性肺损伤的保护作用机制及途径。方法:选用SPF级雄性ICR小鼠40只,分为4组,每组10只,即空白对照组、PM2.5模型组、中药等效组和中药二倍组。在实验开始的第1d进行灌胃给药,连续7d。于实验的第8d开始,用PM2.5混悬液经移液枪滴鼻建立急性肺损伤模型,1次/d,连续2天。在末次染毒24h后处死小鼠,用HE染色法制作肺组织病理切片,ELISA法检测肺组织中IL-1β、i NOS、Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶及ATP含量的变化,免疫组织化学法检测肺组织中PGC-1α、Nrf1、TFAM的蛋白表达情况,Western Blot法检测肺组织中能量代谢相关蛋白(AMPK、PGC-1α、TFAM)及凋亡相关蛋白(Bcl-2、Bax)的表达水平。结果:1.小鼠肺组织HE染色结果:与PM2.5模型组相比,中药等效组肺组织中存在少数肺泡结构不完整,肺间质可见充血伴炎症细胞增多。中药二倍组肺组织中有少量炎症细胞,见较完整肺泡结构。2.ELISA结果:较PM2.5模型组相比,中药二倍组中IL-1β、i NOS的含量有所降低(P<0.01),肺组织中ATP的含量有所增加(P<0.05)、Na+-K+-ATP酶与Ca2+-Mg2+-ATP酶的表达则均有不同程度的增加(P<0.01)。3.免疫组化结果:与PM2.5模型组相较,中药等效组与二倍组肺组织中PGC-1α、Nrf1、TFAM的阳性表达均有升高(P<0.01)。4.Western Blot结果:与PM2.5模型组相比,中药等效组与二倍组可显著上调肺组织中AMPK、PGC-1α、TFAM蛋白相对表达量,差异有统计学意义(P<0.01)。与PM2.5模型组相比,中药等效组和二倍组肺组织中的Bax的表达量显著下降,Bcl-2的表达量显著升高,且两组间差异有统计学意义(P<0.01)。结论:红景清肺方可通过调节能量代谢相关蛋白的表达,抑制炎症因子,促进线粒体生物合成,减少线粒体损伤,抑制细胞凋亡进而改善PM2.5所致小鼠肺组织炎性损伤,从而保护肺组织。
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