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实验背景及目的:
宫颈癌是危害妇女健康的主要恶性肿瘤之一,是全球妇女中仅次于乳腺癌的第二个最常见的恶性肿瘤。在一些发展中国家仍居第一位。我国每年新增病例为13.15万,约占总数的1/3。普查普治工作的开展,使一些国家和地区的宫颈癌患病率及死亡率明显下降。但青年妇女宫颈癌的发病有上升趋势。宫颈癌淋巴结转移和复发严重影响其预后。导致宫颈癌淋巴结转移、复发的因素有很多,宫颈癌治疗后随访监测复发的手段有限,主要有盆腔检查、细胞学检查、病理检查、CT、MIR。新的检测手段成为研究热点,以期能在术前及术后做一个预测,评估手术后复发率并考虑辅助治疗即追加治疗,减少复发率。
骨桥蛋白(osteopontin,OPN)是一种具有多种功能分泌型钙结合磷酸化糖蛋白,它能与骨组织中的羟磷灰石紧密结合,参与调节骨钙的沉积。其分子量为41.5kD,存在于人的尿、乳汁等体液以及胃肠道、膀胱、胰腺、肺、支气管等组织中。在胃癌、肝癌、卵巢上皮性癌与子宫内膜癌、富颈癌等多种恶性肿瘤组织中高表达,与肿瘤的黏附、侵袭及转移等恶性行为密切相关。本研究应用免疫组化检测150例宫颈癌石蜡包埋标本及20例正常宫颈组织石蜡包埋标本,ELISA法检测45例新鲜宫颈癌组织、血清中骨桥蛋白的表达情况。分析骨桥蛋白的表达与宫颈癌病理类型、病理分期、有无淋巴结转移、HPV等临床诊断的关系,探讨其临床意义。
实验方法:
采用免疫组化法检测150例宫颈癌组织和20例正常宫颈组织中骨桥蛋白的表达。另采用ELISA法检测45例宫颈癌组织、癌旁正常组织、手术切除淋巴结组织及血清中骨桥蛋白的表达和10例子宫良性病变组织中骨桥蛋白的表达。并与宫颈癌病理类型、病理分期、有无淋巴结转移、HPV等临床诊断做相关性分析。
实验结果:
免疫组化法得实验结果1)宫颈癌中OPN的阳性率为60.7%,正常宫颈组织中OPN的阳性率为10%,OPN在宫颈癌及正常宫颈组织的表达中有显著性差异。2)宫颈鳞癌中OPN的阳性率为61.1%。在宫颈腺癌中OPN的阳性率为58.3%。OPN在宫颈鳞癌和腺癌的表达中无显著性差异。3)OPN在正常宫颈组织中的表达为8%,上皮内瘤变的表达为9%,宫颈癌Ⅰ期的表达为40%,宫颈癌Ⅱ期的表达为59%,宫颈癌Ⅲ期的表达为75%。即随着正常宫颈组织→上皮内瘤变→宫颈癌Ⅰ期→宫颈癌Ⅱ期→宫颈癌Ⅲ期OPN的阳性表达率表达呈递增趋势。4)在转移组中宫颈癌组织OPN阳性率为8096;非转移组中宫颈癌组织OPN阳性率为57%,统计学分析OPN在转移组及非转移组中有显著性差异。ELISA法得实验结果1)OPN在鳞状细胞癌组织匀浆液中的平均值为712ng/ml;在宫颈腺癌组织匀浆液中的平均值为680ng/ml。OPN在宫颈鳞癌病人血浆中平均值为356ng/ml;在宫颈腺癌病人血浆中,平均值为348ng/ml。OPN在宫颈鳞癌及宫颈腺癌中无显著性差异。2)OPN在上皮内瘤变组织匀浆液中的平均值为280ng/ml。在宫颈癌Ⅰ-Ⅱ期组织匀浆液中的平均值为560ng/ml,在宫颈癌Ⅲ-Ⅳ期组织匀浆液中的平均值为825ng/ml,在正常宫颈组织匀浆液中的平均值为100 ng/ml。OPN在上皮内瘤变病人血浆中的平均值为176ng/ml。在宫颈癌Ⅰ-Ⅱ期病人血浆中的平均值为290ng/ml,在宫颈癌Ⅲ-Ⅳ期病人血浆中的平均值为412ng/ml,在宫颈良性病变病人血浆中的平均值为100 ng/ml。OPN在正常宫颈组织→上皮内瘤变→宫颈癌Ⅰ期→宫颈癌Ⅱ期→宫颈癌Ⅲ期组织匀浆液及血浆中的值呈递增趋势。3)OPN在转移组组织匀浆液中,原发灶中的平均值为830ng/ml,淋巴结中的平均值为620ng/ml,癌旁组织中的平均值为350ng/ml,正常组织中的平均值为150ng/ml;OPN在非转移组组织匀浆液中,原发灶中的平均值为480ng/ml,淋巴结中的平均值为260ng/ml,癌旁组织中的平均值为280ng/ml,正常组织中的平均值为90ng/ml。OPN在淋巴结转移组病人血浆中的平均值为442ng/ml;在非淋巴结转移组病人血浆中的平均值285ng/ml。在转移组非转移组中组织匀浆液及血浆OPN的平均值有显著性差异。
实验结论:
OPN与宫颈癌的病理分型未见相关性;与宫颈癌病理分期及转移有显著的相关性。OPN参与了宫颈癌的发生、发展及预后。定量检测其水平对宫颈癌的诊断及预后有一定价值。