本研究结果如下： 1.本研究克隆的斜带石斑鱼IL-1β基因由5个外显子和4个内含子组成，其cDNA序列由1，364个碱基组成，含有一个长765 bp的开放读码框，编码一段含254个氨基酸的前体蛋白。与其他鱼类IL-1β相似，斜带石斑鱼IL-1β基因所编码的蛋白拥有12个β-折叠链，IL-1家族标识序列和3’非编码区的mRNA不稳定基序，但缺少了分泌蛋白的信号肽序列以及哺乳动物中保守的IL-1β转换酶切割位点。与其他脊椎动物IL-1β核苷酸序列和氨基酸序列同源性分析和进化树分析发现，斜带石斑鱼IL-1β与鲈形目和鲽形目IL-1β亲缘关系最近，与哺乳动物进化关系最远。 2.斜带石斑鱼IL-1β基因在所检测的神经组织和外周组织中广泛表达。除前肠、脂肪和卵巢外的外周组织都能表达IL-1β mRNA，其中以脾脏、头肾、肾脏、肝脏、心脏和鳃的IL-1β基因表达量较高，其次是红肌、后肠、胸腺和胃。在端脑、下丘脑、中脑．丘脑、小脑和垂体等神经组织中均能检测到IL-1βmRNA的表达。这些证据显示，斜带石斑鱼IL-1β可能参与体内局部和全身的信号传递。 使用不同的分裂素(双链RNA类似物，Poly I：C；植物凝集素，PHA；伴刀豆球蛋白，ConA；脂多糖，LPS)刺激斜带石斑鱼外周血白细胞，都能诱导IL-1β基因的表达，并以Poly I：C和LPS效果最为显著，但Poly I：C和LPS的作用效果并不相同。上述研究结果说明IL1β基因可能通过与哺乳动物类似的途径参与抵御感染的免疫应答。 本研究首次报道鱼类脑部不同分区组织的IL-1 β分布情况，及分裂素PHA，ConA和Poly I：C对鱼类IL-1β基因表达的影响。 3.利用大肠杆菌系统重组表达斜带石斑鱼IL-1β成熟肽。通过对诱导的时间、温度和IPTG浓度的优化，在30℃，0.5 mM IPTG诱导4小时后获得高产量，可溶性的斜带石斑鱼重组IL-1β蛋白。以抗组氨酸标签的单抗为一抗的Western杂交鉴定纯化和脱盐后的重组蛋白确为斜带石斑鱼IL-1β蛋白。 利用该重组蛋白对新西兰雄兔进行免疫，经ELIJSA和Westem杂交鉴定，所制备的斜带石斑鱼IL-1β多克隆抗血清效价较高，并具有一定的特异性。 4.通过细胞增殖实验检测斜带石斑鱼重组IL-1β蛋白的生物活性，发现10ng／ml以上浓度的重组蛋白已经能够有效刺激斜带石斑鱼头肾细胞的增殖，并存在剂量依存效应。通过离体孵育和RT-PCR技术检测，发现无论在斜带石斑鱼外周血白细胞还是头肾细胞中，10 ng／ml重组蛋白都能比lO gg／ml LPS更强力的诱导下游炎症因子COX-2和IL-1β本身mRNA的表达。 结果说明，原核系统表达的斜带石斑鱼IL-1β重组蛋白能够促进免疫细胞活化增殖，以及启动和调节下游基因COX-2和IL-1β基因表达的生物学活性，有望作为免疫调节剂应用于实际生产，提高鱼类抗病能力。 5.采用RT-PCR．技术，检测斜带石斑鱼IL-1β重组蛋白和MAPK信号通路抑制剂共刺激孵育对斜带石斑鱼头。肾细胞COX-2和IL-1β本身mRNA表达的影响。结果显示，在头肾细胞中，两种信号通路抑制剂SB 203580和SP 600125能够完全阻断IL-1β重组蛋白对COX-2的诱导表达，但只能部分抑制IL-1β基因所受到的诱导表达作用。本研究首次报道鱼类IL-1β下游信号通路抑制剂对其下游基因表达的影响。 结果说明，斜带石斑鱼重组IL-1β的下游信号通路与哺乳动物的IL-1β相似，能够被同样的抑制剂部分抑制或完全阻断其诱导的下游基因表达。