乳腺癌是最常见的女性恶性腺癌之一，其发病率与致死率均居各癌症前列。化疗是目前常用的癌症治疗策略，但由于多种原因，病人在治疗的开始阶段或者随着疗程的进行，常对化疗药物耐药，导致化疗失败。从某种程度上说，耐药是癌症病人死亡的主要原因之一，但耐药的分子机制尚未完全阐明。已有研究表明，miRNAs可通过转录后水平调控基因的表达，从而参与调控肿瘤细胞的耐药性。因此，研究调控乳腺癌耐药的主要miRNAs，有助于加深我们对乳腺癌耐药的理解，并为miRNA作为治疗乳腺癌的方式打下基础。　　我们从髓性乳腺癌细胞Bcap37出发，通过以化疗药物紫杉醇长期驯化的方式，筛选得到两株耐药细胞，并通过miRNA芯片和高通量筛选技术筛出两个在亲代细胞和耐药细胞中差异表达的miRNA分子:miRNA-20a-5p及miRNA-20b-5p，二者属于同一家族，目前其在乳腺癌耐药方面作用及机制还不明确。因此，本文系统研究了这两个miRNAs、尤其是miRNA-20a-5p与乳腺癌耐药之间的关系，并对其失调的机制及调控乳腺癌生长与耐药的机制进行了全面研究。　　我们发现，miRNA-20a-5p及miRNA-20b-5p在乳腺癌组织中相比正常乳腺组织表达下调，在复发病人中相比未复发病人中表达更低，且二者的表达量与细胞的耐药性负相关。统计分析发现，miRNA-20a-5p的低表达与乳腺癌的进展密切相关，且可作为预测病人预后的独立风险因子。Kaplan-Meier生存分析表明低表达的miRNA-20a-5p及miRNA-20b-5p与病人低的总生存率相关。这些结果表明miRNA-20a-5p及miRNA-20b-5p是乳腺癌生长与耐药相关的miRNAs。　　体外实验表明，miRNA-20a-5p及miRNA-20b-5p可显著抑制乳腺癌细胞增殖与耐药。该抑制作用除了对BCap37系列细胞有效外，还对其它乳腺癌细胞株及宫颈癌细胞株Hela也有效。此外，miRNA-20a-5p及miRNA-20b-5p不但可增加紫杉醇的疗效，还可增加多种化疗药物如阿霉素、吉西他滨、氟尿嘧啶、长春瑞滨等的疗效。裸鼠体内实验表明，miRNA-20a-5p可显著增强紫杉醇对耐药乳腺癌的抑制作用，降低其耐药性。　　我们通过生物信息学技术，预测并分析了miRNA-20a-5p的靶标。我们分别将这些靶标以荧光素酶报告基因方法验证，发现TGFBR2、PDGFRA、CCND1、E2F1及MAPK1可能是miRNA-20a-5p在调控乳腺癌细胞耐药与增殖过程中的靶基因。在这5个靶基因中，miRNA-20a-5p对MAPK1的抑制作用最强，且其作为miRNA-20a-5p的靶标还未见报道，因此我们着重对MAPK1进行了研究。结果表明，miRNA-20a-5p是通过抑制MAPK1来抑制细胞的增殖与耐药的。一方面，miRNA-20a-5p可通过抑制MAPK1来抑制MAPK/ERK信号通路，从而抑制细胞生长，促进细胞凋亡;另一方面，MAPK1被抑制后，耐药蛋白P-gp也被抑制，从而降低了细胞的耐药性。　　进一步地，本文还研究了miRNA-20a-5p表达失调的机制。一方面，在耐药细胞中，组蛋白甲基化失调导致miRNA-20a-5p表达下降;另一方面，作为MAPK/ERK信号通路的下游分子，c-Myc促进miRNA-20a-5p家族的表达，形成一个反馈环路。因此，肿瘤的进展将最终取决于MAPK1和c-Myc逃避miRNA-20a-5p抑制的能力。　　综上所述表明，我们筛得的乳腺癌耐药相关的miRNA-20a-5p及miRNA-20b-5p可作为判断乳腺癌预后的风险因子;二者可显著抑制乳腺癌细胞的增殖与耐药，且该抑制作用是通过直接靶向MAPK1实现的。同时，miRNA-20a-5p自身又受到基因调控区组蛋白甲基化及MAPK/ERK通路下游转录因子c-Myc的调控。这些结果将有助于加深我们对乳腺癌耐药的理解，并为乳腺癌的治疗提供潜在靶点。