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目的:
本项研究目的是通过观察球后注射壳聚糖/甘油磷酸二钠凝胶对实验性近视豚鼠的眼轴,屈光度及对后巩膜形态的影响,进一步探讨壳聚糖/甘油磷酸二钠凝胶作为球后注射加固材料对后巩膜的加固作用,为今后的临床应用提供理论和实验依据。
方法:
选用2~3周龄的健康花色豚鼠35只,实验前对所有豚鼠进行散瞳检影验光、裂隙灯及眼底检查,排除先天性近视,用半透明眼罩遮盖法建立近视眼动物模型。所有动物均适应性喂养一周后随机分组,A组:空白对照组(5只),不作任何处理:B组:模型组(15只),从造模开始持续遮盖右眼至实验结束;C组:手术组(15只),豚鼠半透明眼罩遮盖两周后,再球后注射壳聚糖/甘油磷酸二钠凝胶后继续遮盖右眼。每组均以右眼为遮盖眼(实验眼),左眼为自身对照眼。ABC三组在实验的2周,4周,6周,10周分别测定屈光度,眼轴,CT和光镜检查。各组数据采用SPSS19.0统计软件进行处理,以均数±标准差(()±S)表示,模型组与手术组、空白对照组间比较采用两样本t检验。对组内实验前、后及左、右眼的屈光度数差异、眼轴长度比较采用配对t检验。以a=0.05为检验水准,用P〈0.05为差别有显著性意义。
结果:
(1)实验表明,两周后近视眼造模成功,造模后实验眼的眼轴长度较对照眼明显增长,屈光度改变,形成轻度近视,具有统计学意义(P〈0.05)。实验中,手术组在实验的4周,6周,10周后组内比较眼轴,屈光度无明显变化(P>0.05),不具有统计学意义,说明球后注射C/GP后可稳定控制近视眼模型的眼轴和屈光度。模型组在实验的2周,4周,6周,10周组内比较屈光度数与眼轴长度变化均有显著性差异(P〈0.05)。同时期空白组,模型组,手术组屈光度,眼轴组间比较均有显著性差异(P〈0.05),具有统计学意义。
(2)通过观察,壳聚糖/甘油磷酸二钠凝胶(C/GP)的理化性质比较稳定,在水浴中为液态,随着温度上升其性质发生变化,成凝胶状并且垂直90度也可以较稳固的立于试管中,而且性质变化不可逆转。
(3)CT显示球后注射C/GP后2周实验眼的后巩膜厚度明显厚于对照眼,后巩膜处有一密度较均匀的条带状阴影。球后注射C/GP后4周,8周后巩膜条带与巩膜紧密贴和。
(4)HE染色显示:模型组豚鼠遮盖眼的后极部巩膜与空白组比较明显变薄,成纤维细胞密度降低,细胞外基质增多,并且随着遮盖时间的延长呈现明显的梯度改变。手术组实验4周后检查可见C/GP中有炎性细胞及少量成纤维细胞侵润。还可见少量新生血管形成。实验6周后可见注射物与巩膜连接处胶原纤维组织增多,C/GP结构逐渐松散,近宿主部分巩膜被自身结缔组织替代。实验10周巩膜自身结缔组织与可注射性壳聚糖/甘油磷酸盐逐渐形成交织的形态结构,C/GP逐渐消失,被巩膜结缔组织所代替,可见散在的炎性细胞及新生血管形成。
结论:
1.通过用半透明眼罩复制豚鼠形觉剥夺性近视的动物模型是成功的。
2.球后注射壳聚糖/甘油磷酸盐(C/GP)凝胶可控制实验性近视豚鼠眼轴增长、稳定近视度。
3.壳聚糖/甘油磷酸二钠凝胶与后巩膜形成密度较均匀的条带对后巩膜起支撑作用。在与巩膜融合过程中有成纤维细胞及胶原纤维生成并诱导新生血管的生成,作为其生长的支架加厚后巩膜,改善眼后极部血液供应,可作为三维网络支架。