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羟基人参二醇(Hydroxylation panoxadiol,简称HPD)是首次从西洋参茎叶总皂苷分离鉴定的一种三萜类新化合物。研究表明,手性结构修饰方法制备的HPD达到了工业化水平;抗宫颈癌的药理活性较强;毒性较低;将其制成的HPD注射液具有良好开发一类创新药物的前景,其中药代动力学是开发创新药物的重要内容之一,目前大鼠体内的药代动力学研究尚未见报道。本论文首次建立了大鼠血浆、组织及排泄物中HPD的UPLC-MS/MS定量分析方法,研究了经静脉给予大鼠HPD注射液,药物在大鼠体内的吸收、分布和排泄规律,同时测定了HPD在体外的血浆蛋白结合率;首次建立了大鼠体内HPD代谢物的UPLC-Q-TOF/MS定性分析方法,鉴定了其代谢产物,揭示了HPD在大鼠体内的代谢规律。取得以下创新成果:1、HPD注射液的血药浓度-时间曲线研究首次建立了大鼠血浆中HPD的UPLC-MS/MS定量分析方法。测定了经静脉给予大鼠低、中、高三个剂量组(8.0,16.0,32.0mg/kg)的HPD注射液后,不同时间点血浆中的药物浓度。实验数据经DAS3.0软件计算,获得的HPD注射液药代动力学的相关参数如下:低剂量组,T1/2 5.76±1.46h,Cmax5535.33±610.76μg/L,Tmax 0.10±0.00h,AUC(0-t)11670.15±1364.30μg·h/L,AUC(0-∞)12023.88±1573.57μg·h/L,Vz 5.52±1.22 L/kg,CLz 0.67±0.08 L/h/kg;中剂量组,T1/2 6.50±1.05h,Cmax 12344.29±1631.71μg/L,Tmax 0.10±0.00h,AUC(0-t)26253.13±4307.29μg·h/L,AUC(0-∞)26986.39±4635.18μg·h/L,Vz 5.63±0.90L/kg,CLz 0.61±0.10L/h/kg;高剂量组,T1/2 6.41±1.40h,Cmax 24683.57±3693.03μg/L,Tmax 0.10±0.00h,AUC(0-t)48503.57±5309.65μg·h/L,AUC(0-∞)49165.27±5335.80μg·h/L,Vz 6.07±1.41L/kg,CLz 0.66±0.07L/h/kg。结果表明,AUC、Cmax与HPD的给药剂量均成正比例关系,符合一级动力学特征;Vz 5.52-6.07L/kg提示不仅分布在血液中,在组织中也有分布;T1/2 5.76-6.50h及CLz 0.61-0.67L/h/kg提示HPD注射液的消除较慢。2、HPD注射液的分布研究首次建立了测定大鼠组织中HPD的UPLC-MS/MS定量分析方法。分别测定了大鼠静脉给予16.0mg/kg的HPD注射液后,不同时间点(15min,1h,4h,6h)大鼠13个组织(心、肺、脾、肝、肾、小肠、大肠、胃、肌肉、脂肪、脑、子宫和睾丸)中HPD的含量。结果显示,HPD快速广泛地分布到各个组织中;主要分布在肾、子宫组织中,其它各个组织中的分布情况随时间不同而各有差异;并且在各组织中均未产生蓄积作用。3、HPD注射液的血浆蛋白结合率研究首次建立了HPD在大鼠血浆、犬血浆、人血浆及透析液中的UPLC-MS/MS定量分析方法。结合平衡透析法,分别测定了HPD与上述三种血浆的蛋白结合率,结果如下:0.1μg/m L、4.0μg/m L和16μg/m L三个浓度的HPD与大鼠血浆的蛋白结合率分别为68.36%、69.07%和70.48%;与犬血浆的蛋白结合率分别为67.66%、74.42%和72.32%;与人血浆的蛋白结合率分别为65.19%、68.40%和66.09%。结果表明,在0.1μg/m L-16.0μg/m L的范围内,HPD与上述三种血浆的蛋白结合率都不具有浓度依赖性;三种血浆的蛋白结合率种属间无明显差异。4、HPD注射液的排泄研究首次建立了大鼠胆汁、尿和粪样中HPD的UPLC-MS/MS定量分析方法。分别测定了大鼠静脉给予16.0mg/kg的HPD注射液后,大鼠胆汁、尿和粪样中不同时间段HPD的含量,结果如下:胆汁在36h内累积排泄百分比仅为0.06%,而尿和粪在72h内累积排泄百分比分别为46.39%和0.18%。结果表明,HPD注射液的原型药经胆汁和尿的排泄极少,主要经粪便排泄;由于三种排泄物中总的累积排泄百分比仅为46.63%,表明其在大鼠体内的生物转化是以代谢消除为主。5、HPD注射液的代谢研究首次建立了大鼠胆汁、尿和粪样中HPD代谢物的UPLC-Q-TOF/MS定性分析方法。鉴定了大鼠经静脉给予16.0mg/kg的HPD注射液后,大鼠粪、尿和胆汁在72h内的代谢产物,结果如下:HPD注射液在大鼠体内除原形药外,共检测到21个代谢产物,其中粪样和尿样中共检测出13个代谢产物,12个为Ⅰ相代谢产物;在胆汁样品中共检测出8个代谢产物,5个为Ⅱ相代谢产物。结果表明,HPD在大鼠体内Ⅰ相代谢和Ⅱ相代谢会同时发生,而且Ⅰ相代谢产物主要发生在粪和尿中,Ⅱ相代物主要发生在胆汁中。