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人类健康和动物健康紧密相联,畜产品品质直接影响人体健康和动物生产效益。肥胖是对人类健康的最大威胁,糖和脂肪过量摄入引起的营养过剩是导致肥胖发生的主要诱因。作为人类食用最为广泛且相对廉价的膳食蛋白质来源之一,鸡肉的品质受到人们的广泛关注。随着集约化、规模化养殖的发展,在家禽生产中过度追求生长速率的同时,往往忽略了腹脂的过度沉积。肉鸡脂肪沉积过甚不但影响胴体品质、降低饲料利用率、增加代谢性疾病发病率,更严重的是消费者摄入过多低品质的肉制品会增加肥胖、糖尿病、动脉粥样硬化等心疾病的发病率。因此,降低肉鸡腹脂沉积、提高肉品品质已成为家禽养殖业亟待解决的关键问题之一。作为糖、脂代谢途径中重要的代谢中间体-柠檬酸的结构类似物,(-)-羟基柠檬酸[(-)-HCA]潜在的生物学功能在于调节机体营养物质的代谢流向,进而发挥其降低脂肪沉积、控制体增重等诸多生物学作用。有关(-)-HCA降低脂肪沉积的作用已得到广泛证实,但其具体生物学机制还不是很清楚,特别是其是否通过影响机体糖代谢进而间接调控脂肪沉积方面的探讨更是鲜有报道。因此,本研究以胚胎期肉鸡为研究对象,分析(-)-HCA处理对不同胚龄阶段肉鸡肝脏葡萄糖代谢和能量代谢相关因子及cAMP/CREB-PGC-1α信号通路的影响,研究旨在深入阐明(-)-HCA降脂效应的生化机制,并为其在畜禽生产中的应用提供一定的试验依据和理论基础。1(-)-羟基柠檬酸对胚胎期肉鸡糖代谢的影响为探讨(-)-羟基柠檬酸[(-)-HCA]对胚胎期肉鸡糖代谢的影响,270枚罗氏308肉鸡种蛋(65±0.2 g)随机分为3组,分别按照0、1.0和10 mg/kg(n=90)蛋重导入溶于50 μL DMSO中的(-)-HCA。置于温度37±0.5℃,湿度65%条件下孵化至14日龄(E14)、19日龄(E19)和出壳1日龄(H1)时,采集血液及肝脏样品、待测。试验结果表明,与对照组相比,(-)-HCA处理可显著提高E19和H1日龄肉鸡血清葡萄糖和柠檬酸的含量,显著降低乳酸的含量(P<0.05);(-)-HCA处理通过增强糖原合成酶的基因表达水平而提高E19和H1日龄肉鸡肝糖原含量(P<0.05);(-)-HCA处理可显著降低E19和H1日龄肉鸡肝脏中果糖2,6-二磷酸(F-2,6-BP)含量、磷酸果糖激酶-1(PFK-1)活性以及丙酮酸激酶(PK)活性和蛋白表达水平(P<0.05);(-)-HCA处理可显著提高E19和H1日龄肉鸡肝脏中果糖-6-磷酸酶(G6P)、丙酮酸羧化酶(PC)、果糖-1,6-二磷酸酶(FBP1)mRNA水平以及磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)活性(P<0.05)。以上结果提示,(-)-HCA通过调控糖代谢途径中关键因子的表达水平而抑制胚胎期肉鸡的糖酵解、加速糖异生。2(-)-羟基柠檬酸对胚胎期肉鸡脂肪代谢和能量代谢的影响为探讨(-)-羟基柠檬酸[(-)-HCA]对胚胎期肉鸡脂肪代谢和能量代谢的影响,270枚罗氏308肉鸡种蛋(65±0.2 g)被随机分为3组,分别按照0、1.0和10 mg/kg(n=90)蛋重导入(-)-HCA。置于温度37±0.5℃,湿度65%条件下孵化至14日龄(E14)、19日龄(E19)和出壳1日龄(H1)时,采集肝脏样品、待测。试验结果表明,与对照组相比,(-)-HCA处理降低了不同发育阶段胚胎期肉鸡肝脏中甘油三酯(TG)含量,而显著提高了肝脏非酯化脂肪酸(NEFA)含量(P<0.05)。(-)-HCA处理可显著提高不同发育阶段胚胎期肉鸡肝脏中过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助激活因子-1α(PGC-1α)、过氧化物增殖体激活受体α(PPARα)的mRNA表达水平和烯酰辅酶A水合酶短链1(ECHS1)的蛋白表达水平。与对照组相比,(-)-HCA处理可提高E19和H1日龄肉鸡肝脏组织线粒体中柠檬酸含量、琥珀酸脱氢酶(SDH)活性以及蛋白表达水平(P<0.05)。以上结果提示,(-)-HCA通地促进胚胎期肉鸡脂肪的氧化分解而提高柠檬酸循环、氧化呼吸链中关键因子的表达水平,进而加速胚胎期肉鸡的能量代谢。3(-)-羟基柠檬酸对胚胎期肉鸡cAMP/CREB-PGC-1 α信号通路的影响为探讨(-)-羟基柠檬酸[(-)-HCA]对胚胎期肉鸡能量代谢影响的信号转导机制,270枚罗氏308肉鸡种蛋(65±0.2 g)随机分为3组,分别按照0、1.0和10 mg/kg(n=90)蛋重导入(-)-HCA。置于温度37±0.5℃,湿度65%条件下孵化至14日龄(E14)、19日龄(E19)和出壳1日龄(H1)时,采集肝脏样品、待测。试验结果表明,与对照组相比,(-)-HCA处理可显著提高E19和H1日龄肉鸡肝脏中cAMP含量(P<0.05);cAMP应答元件结合蛋白(CREB)总蛋白水平无显著差异,但(-)-HCA可显著提高E19和H1日龄肉鸡肝脏中p-CREB蛋白水平(P<0.05)。与对照组相比,(-)-HCA处理可显著增强E19和H1日龄肉鸡肝脏中过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)辅助激活因子-1α(PGC-1α)、肝细胞核因子4A(HNF4A)和核呼吸因子-1(NRF-1)蛋白质表达水平(P<0.05)。此外,(-)-HCA处理可提高E19和H1日龄肉鸡肝脏组织磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)、丙酮酸羧化酶(PC)、果糖-1,6-二磷酸酶(FBP1)以及MT-ND1(NADH脱氢酶)的蛋白表达水平(P<0.05)。以上结果提示,(-)-HCA通过激活 cAMP/CREB-PGC1α-HNF4A 信号通路加速糖异生,通过激活cAMP/CREB-PGC1α-NRF-1信号通路加速能量代谢。