槲皮素对大鼠子宫内膜异位症模型的促凋亡机制研究

来源 :上海中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tianbentb
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目的:探究槲皮素对SD大鼠子宫内膜异位症模型的药效作用及促凋亡机制研究。   方法:手术移植法建立大鼠子宫内膜异位症模型,将造模成功大鼠随机分为6个组,分别为:槲皮素60mg/kg/d组,槲皮素150mg/kg/d组,槲皮素375mg/kg/d组,孕三烯酮5mg/kg/2d组,模型对照组和去势组,各组灌胃给药,给药第22天麻醉后,腹主动脉取血处死。通过以下几个方面判定药效:测量用药前及用药后体积,计算抑制率;用ELISA法,测定大鼠用药前后血清雌孕激素及用药后血清CA125的表达水平。异位内膜组织HE染色,测量异位内膜腺上皮高度。通过以下几种方法观察槲皮素促凋亡机制:荧光TUNEL法,观察槲皮素促凋亡的组织形态学表现;免疫组化法,观察各凋亡因子(bcl-2,bax,caspase-3,caspase-9)的表达定位:蛋白印迹法测定各凋亡因子(bcl-2,bax,caspase-3,caspase-9)表达量。   结果:在药效方面,槲皮素60mg/kg/d组可显著升调血清CA125水平,与模型组相比,P<0.05。槲皮素150mg/kg/d组可显著升调血清孕激素水平,与模型组相比,P<0.05。槲皮素150mg/kg/d组可显著降调血清雌激素水平,与用药前相比,P<0.05。槲皮素375mg/kg/d组可显著抑制异位内膜生长,抑制率显著升高,与模型组相比,P<0.05。槲皮素三个剂量组可显著降低异位内膜腺上皮高度,与模型组相比,P<0.05。在促进细胞凋亡方面,细胞凋亡因子bcl-2,bax,caspase-3,caspas-9主要表达于异位内膜间质细胞胞浆内。槲皮素60mg/kg/d组,槲皮素150mg/kg/d组,槲皮素375mg/kg/d组,都可显著降调bcl-2的表达量,与模型组相比,P<0.05。槲皮素三个剂量组对bax的表达无显著影响,与模型组相比,P>0.05。槲皮素150mg/kg/d组,槲皮素375mg/kg/d组,可显著升调caspase-3的表达,与模型组相比,P<0.05。槲皮素150mg/kg/d组,槲皮素375mg/kg/d组,可显著升调caspase-9的表达,与模型组相比,P<0.05。TUNEL法测定发现,槲皮素375mg/kg/d组与模型组相比,核碎裂现象明显。   结论:槲皮素375mg/kg/d组可显著抑制异位内膜生长,主要通过bcl-2-caspase-9-caspase-3凋亡途径,诱导间质细胞核碎裂起作用。
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