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第一章中,我们以Ru(bpy)2(dcbpy)NHS作为ECL标记物,将电化学发光免疫分析法和磁球放大技术相结合,发展了一种超灵敏的检测抗原、抗体的电化学发光检测方法。该法中亚微米磁球表面因为修饰了大量的发光体分子而起到信号放大的作用。实验中我们利用抗体表面的氨基与盖玻片基底上硅烷化后的环氧基的反应将抗体固定在基底表面,然后经免疫反应、生物素与链霉亲和素的特异性反应等最终形成链霉亲和素化的磁球-生物素化的抗体-抗原-抗体双抗夹心式的复合物,然后进行解离。利用Ru(bpy)2(dcbpy)NHS上的酯基与磁球上的链霉亲和素之间的结合反应将ECL标记物标记到磁球表面,实验时将修饰了ECL标记物的磁球用磁铁固定到Au电极表面。在三丙胺存在的条件下进行ECL检测,在1.35 V得到最大的电化学发光强度(Im,ECL)。利用Im,ECL,我们可以实现对抗原的检测。利用链霉亲和素修饰的磁球(SA-SMBs)可以增加单个目标分子对应的Ru(bpy)32+分子的数量,通过信号放大作用,大大提高了Ru(bpy)32+分子的电化学氧化得到的第二个ECL波,从而提高了检测方法的灵敏度。利用这种方法,我们实现了对CEA的检测,线性范围为1.0×10-14 mol/L~3.0×10-13mol/L。第二章中,我们引入电化学发光作为供体光源研究了一种新的共振能量转移体系-电化学发光共振能量转移体系(ECRET)。电化学发光试剂异鲁米诺在过氧化氢存在的条件下,通过电化学反应发出中心波长为460 nm的蓝色光充当能量供体;另外,选择最大发射峰为655 nm的红色荧光量子点作为能量受体。当向电极上施加一电位时,电化学发光供体将能量转移给量子点受体,产生高效的电化学发光共振能量转移。ECRET技术可被应用于研究核酸等生物分子间的相互作用,DNA分析及免疫分析。