菜豆响应盐胁迫的适应机制和外源褪黑素的调节作用研究

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菜豆(Phaseolus vulgaris L.)是一种重要的豆科作物,确定耐盐品种筛选方法,研究菜豆耐盐机理,对菜豆育种具有重要意义。前期利用4个菜豆品种确定最适宜品种筛选的NaCl浓度,使用该浓度对40个菜豆品种进行盐处理,以生长量、根冠比、株高、叶面积和净光合的相对值作为耐盐评价依据,采用加权隶属函数和聚类分析对不同菜豆品种耐盐性进行综合评价和耐盐等级划分,随后对耐盐品种和盐敏感型品种进行生理指标测定,前期实验表明褪黑素对菜豆盐胁迫具有缓解作用,为了比较耐盐品种对盐胁迫的耐受机制及褪黑素处理提升菜豆盐胁迫耐受的机制,对筛选到的高耐盐品种P19023和盐极敏感型品种P16028进行100 mmol·L-1的NaCl胁迫处理并对盐极敏感品种进行盐胁迫下100μmol·L-1的褪黑素处理,处理6 h后进行转录组代谢组采样,结果如下:1.建立了菜豆耐盐品种筛选方法,将40个菜豆品种分为高耐盐,耐盐,较耐盐,盐敏感,盐极敏感5类,筛选出5个高耐盐品种P16152、P19023、P18009、P18012、P18051,对5个高耐盐型品种和5个盐极敏感型品种的生理指标测定,表明在高耐盐品种和盐极敏感品种中存在着不同的抵抗盐胁迫调节机制,进一步验证了分类结果的准确性。2.两品种盐胁迫下的转录组与代谢组分析表明:细胞壁和亚麻酸代谢相关基因在P19023中的差异表达,可能在盐胁迫下起到维持细胞结构,保护液泡膜功能的作用,黄酮类代谢及萜类代谢相关基因和萜类代谢物龙葵碱与龙葵次碱,在盐胁迫下两品种中都有差异表达,这些基因和代谢物可作为菜豆响应盐胁迫的标志,只在P19023中积累的代谢物异甘草素可能对菜豆抵抗盐胁迫具有重要作用。3.盐胁迫下褪黑素对菜豆盐敏感品种P16028转录组及代谢组分析表明:褪黑素处理改变了Phvul.009G186400、Phvul.009G244500、Phvul.002G152900、Phvul.003G213800、Phvul.005G046000、Phvul.006G147600、Phvul.006G147500等7个细胞壁相关基因和1个钠离子跨膜运输相关基因Phvul.004G177300,使其表达模式与盐胁迫下耐盐品种相同,这些基因可能起到维持细胞结构及将钠离子排出细胞外或运输至液泡中储存的作用,异黄酮类代谢物芒柄花黄素积累量上升,其可能通过促进耐盐根瘤菌的生长提高菜豆对盐胁迫的耐受。
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