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目的： 新生血管增殖性视网膜病变，是一组严重的视网膜病变，其晚期主要表现是大量视网膜新生血管形成，引起玻璃体反复出血、机化和纤维增殖，甚至发展为牵引性视网膜脱离或视网膜萎缩，导致视力严重下降进而完全失明。目前临床治疗仍以激光光凝及玻璃体手术等治标手段为主，尚无有效的药物根治方法。已往大量研究表明，VEGF在新生血管增殖性视网膜病变的发生、发展中起着十分重要的作用，而阻断VEGF的表达和分泌，能抑制视网膜新生血管的形成。本实验拟应用SD大鼠幼鼠动物模型，分析和观察VEGF反义寡聚脱氧核苷酸(VEGF ASODNs)对视网膜新生血管和视网膜正常血管发育的影响，以及对玻璃体视网膜组织和血清中VEGF含量的影响，评价VEGF和VEGF ASODNs在新生血管增殖性视网膜病变中新生血管形成及正常视网膜血管发育中的作用，推测其作用机制，探讨VEGF ASODNs在新生血管增殖性视网膜病变治疗中的临床应用价值。方法：将鼠龄2天(P2) SD幼鼠随机分为4组(每组10只)，第一组为正常对照组，于自然空气中饲养，第二组为球后注射药物组，第三组为尾静脉注射药物组，第四组为未用药组，后三组动物均于高浓度混合氧环境中饲养10天，然后再置于自然空气中饲养。各组幼鼠分别于P14、 P17时予乙醚吸入麻醉后给予相应的处理：正常对照组、未用药组仅注射生理盐水，球后注射药物组和尾静脉注射药物组则分别予球后和尾静脉注射VEGF ASODNs。在P20时无痛处死幼鼠：每只幼鼠取一只眼球经4％多聚甲醛固定以制作病理切片，行HE染色，选相同部位切片30张观察并计数视网膜新生血管芽细胞核数、10张测量视网膜血管横断面积：另一只眼球取球内容物(除角膜、巩膜及晶体外的全部眼内容物)，与此同时，每鼠取血清约0． 5ml，二者均采用竞争性酶免疫测定检测VEGF含量。最后对上述结果进行定量分析。苯二卓医人学 硕士学位论文结果：1．计数各组视网膜新生血管芽细胞核总数，未用药组中视网膜出现新生血管芽量最多，总数为191．l士15．7个，与其他各组相比较均有非常显著的差别（尸＜0．01）。而正常对照组视网膜新生血管芽细胞核则很少，为 37．2土23．5个。球后注射药物组血管芽细胞核数为58．7士42．0个，虽略比正常对照组高，但统计学上无显著的差异（尸＝0．175）。而尾静脉注药组血管芽细胞核为 71．4士21．6个，仍比正常对照组有显著增高（尸＜0．01）。2．比较各组视网膜内血管横断面积总和，球后注射药物组的血管横断面积值最低，为36601．52土9619．78卜m‘，其次为尾静脉用药组，为 46884．19上10908．36 p’，两者无统计学差别（尸＝0．55人而正常对照组视网膜内血管横断面积值最高，为71603．34土2盯53．31 p’，红上述用药组均有显著统计学差异（尸＜0．05）。未用药组为51164．24土16285．22 pm’，略低于正常对照组，但差异无统计学意义（尸＝0．064）；虽然高于球后注射药物组和尾静脉注射药物组，但仅与球后注射药物组有统计学差异（尸 0．05）。3．测定各组玻璃体视网膜组织中 VEGF含量，正常对照组（35．250土13．738 ng／g）和球后注射药物组（38．031士13．668ng／g）均明显低于尾静脉注射药物组（58．678土17．958 ng／g）和未用药组 （79．919土43．043 ng／g），差别有统计学意义（尸＜0．05），而球后注射药物组与正常对照组（尸二 0．701）以及尾静脉注射药物组和未用药物组之间（尸二0．252）则未显示出有统计学意义的差别。4．各组血清VEGF含量测定显示出与玻璃体视网膜组织中VEGF含量测定结果不同的情形。正常对照组血清VEGF含量为 49．038i7．484 ng加，明显高于其他三组（含量分别为球后注射药物组 33．219上4．075 ng／。1，尾静脉注射药物组 35．063士12．850 ng／ml，未用药组 36．972土12．827 ng加L 其中与球后注射药物组有非常显著的差异（尸＜0．001），与尾静脉注射药物组及未用药组亦有显著的差异（尸＜0．05）。而球后注射药物组与尾静脉注射药物组以及未用药组，两两之间的差异均无统计学意义（尸＞0．05）。5．对视网膜新生血管芽细胞核数、视网膜内血管横断面积与玻璃体视网膜组织VEGF、血清VEGF含量四项指标两两进行直线相关分析。结果表明，视网膜新生血管芽细胞核数与玻璃体视网膜组织VEGF含量呈正相关（r＝0．5532，P＜0．01）。视网膜内血管横断面积与血清中 VEGF含量（r＝0．4945， 3第二军医大学 项士学位论丈尸＜0．01）间也存在着明显的正相关性，而其他各组之间无明确的相关关系。结论：1．吸入过高浓度氧的SD幼鼠，其眼内视网膜新生血管芽增生明显，且玻璃体视网膜组织中VEGF含量较正常组明显增高，提示SD幼鼠OIR动物模型造模成功。2．SD幼鼠OIR模型视网膜新生血管芽增生趋势与玻璃体视网膜组织中VEGF含量增加呈正相关，提示幼鼠视网膜发生血管增生性病理改变与眼内