猪δ冠状病毒（Porcine deltacoronavirus,PDCoV）是一种新发现的肠道冠状病毒,能引起新生仔猪腹泻、呕吐、脱水、死亡,致死率能达到30%～40%,严重降低了新生仔猪的存活率,影响了养猪业的发展。在我国已经有多个省份分离了PDCoV地方株,但至今未见PDCoV陕西地方株分离的报道。成功分离PDCoV地方株对陕西地区PDCoV发病机制研究、病毒学和血清学分析以及疫苗开发具有重要意义。表达PDCoV的结构蛋白为后续开发诊断试剂和潜在的PDCoV亚单位疫苗提供了基础。本试验采集陕西省西安某猪场腹泻仔猪的肠道及内容物,利用猪睾丸（ST）细胞进行病原分离,细胞出现明显病变时,利用RT-PCR方法扩增PDCoV西安株M全基因序列并测序,探究其B细胞表位是否发生改变。将M基因与表达载体p ET-32a构建重组质粒,转入到BL21（DE3）菌株诱导表达,以纯化的重组蛋白免疫小鼠制得多克隆抗体。本研究取得如下结果:1. PDCoV分离株盲传5代,感染ST细胞72 h后出现细胞病变,主要表现为细胞变圆、变大、聚集和脱落。RT-PCR检测显示PDCoV阳性,命名为CHN-XA18-35株。F5代细胞毒在ST细胞的TCID₅₀为10^-5.81/100μL。2. 该分离株的M基因与其他地区参考株的核苷酸相似性为98.47%～99.54%,氨基酸相似性为97.24%～99.08%。M蛋白第189位氨基酸由异亮氨酸（Ile）突变为精氨酸（Arg）。3. 构建了M-1-pET-32a重组表达载体,得到优化的表达条件是诱导温度25℃,诱导剂浓度0.5 mmol/L,诱导时间20 h。表达的重组蛋白分子量约为34 ku。4. 重组蛋白经纯化免疫小鼠制得抗血清,中和抗体效价为1:179。可以用作间接免疫荧光法来检测猪δ冠状病毒。结论:1.成功分离并鉴定了PDCoV陕西地方株,M蛋白第189位氨基酸的突变,对其B细胞表位未产生影响。2.重组蛋白有良好的的免疫原性,PDCoV-M抗血清有较好的中和效应。