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Wnt/β-catenin信号通路作为一个在生物体进化过程中高度保守的信号转导途径,调节控制着众多生命活动过程。除了在动物体早期发育中决定着背腹轴的形成、胚层建立等一系列重要事件之外,还参与决定着增殖、分化、凋亡与抗凋亡等细胞的命运。Wnt/β-catenin信号通路的异常激活与肿瘤发生密切相关。为了能够更深入的拓展我们对Wnt信号通路的认识以及对Wnt异常激活引起的结肠癌的治疗,我们从以下几个方面进行了相关的研究。
本论文主要内容是关于Wnt/β-catenin信号通路小分子抑制剂的筛选和作用机理方面的研究。为了寻找能够有效治疗异常激活Wnt信号引起的结肠癌的小分子化合物,我们建立了酵母双杂交筛药系统和哺乳动物细胞报告基因筛药系统。通过筛选,我们发现了三个能够有效抑制Wnt报告基因Top-flash和肿瘤细胞增殖的小分子化合物。进一步实验表明其中的NC00138043(以下简称043)能够抑制Wnt下游靶基因Axin2的mRNA水平和下调Cyclin D1的蛋白质水平。043不影响β-catenin的细胞核质分布和蛋白质水平,但是能够减弱β-catenin和TCF4的相互作用并减少β-catenin在Axin2 promoter上的聚集。043还能够降低Cdc25c和Cdc2蛋白质水平从而导致细胞周期停止在G2/M期。为了检测043对肿瘤细胞成瘤性的影响,我们同时在体外和体内系统进行了检测。我们发现043能够抑制SW480细胞的anchorage-independent生长能力和裸鼠移植瘤的生长。上述结果表明,043是一个有效的Wnt信号途径抑制剂,同时也是很有潜力的肿瘤治疗药物前体,值得进一步深入研究。