【摘 要】
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目的:调查新疆牛、羊和骆驼源非O157产志贺毒素大肠埃希菌（Shiga toxin-producing Escherichia coli,STEC）的系统进化分群、毒力基因、血清群、耐药性及其遗传多样性,为动物源STEC耐药性监测和分子流行病学研究提供数据支持。方法:（1）2018～2019年,从新疆乌鲁木齐、阿勒泰、伊犁、哈密、巴音郭楞蒙古自治州（巴州）、阿克苏、喀什及和田的养殖场、屠宰场和市场
【基金项目】
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国家自然科学基金项目“新疆牛源多重耐药非O157 STEC产生及传播的分子机制研究”（项目编号:3196190185）；
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目的:调查新疆牛、羊和骆驼源非O157产志贺毒素大肠埃希菌（Shiga toxin-producing Escherichia coli,STEC）的系统进化分群、毒力基因、血清群、耐药性及其遗传多样性,为动物源STEC耐药性监测和分子流行病学研究提供数据支持。方法:（1）2018～2019年,从新疆乌鲁木齐、阿勒泰、伊犁、哈密、巴音郭楞蒙古自治州（巴州）、阿克苏、喀什及和田的养殖场、屠宰场和市场收集牛、羊和骆驼粪便、肛拭子和胴体样品2 312份,其中包括牛源1 628份,羊源542份和骆驼源142份,进行非O157 STEC的分离与鉴定。使用伊红美蓝琼脂培养基和科玛嘉STEC显色培养基对菌株进行初步筛选和分离,用特异性引物鉴定STEC。采用多重PCR方法对STEC分离株进行系统进化分群。（2）通过PCR方法对牛、羊和骆驼源STEC进行志贺毒素亚型stx1a～stx2g、毒力基因eae、tir、esp B、saa、iha、ecp A、ehx A、kat P、esp P、sub AB和cdt C及O-血清群检测。（3）采用K-B纸片法测定STEC分离株的耐药表型并对重点菌株进行脉冲场凝胶电泳（Pulsed Field Gel Electrophoresis,PFGE）分型,探究不同源非O157 STEC间的亲缘关系。结果:（1）从2 312份样品中分离到94株STEC菌株,包括牛源57株,羊源25株及骆驼源12株,46.8%（44/94）仅携带stx1,6.4%（6/94）仅携带stx2,46.8%（44/94）同时携带stx1+stx2。系统进化分群结果显示,94株非O157 STEC可分为三群,以B1群为主（83/94,88.3%）,E群（7/94,7.4%）和A群（4/94,4.3%）次之。（2）志贺毒素亚型检测结果显示,94株STEC中stx1a、stx1c、stx2a和stx2d的检出率分别为:83%、60.6%、21.3%和50%。其中牛源以stx1a+stx2d为主,羊和骆驼源以stx1a+stx1c为主。共检测出9种毒力基因,包括eae A（9.6%）、tir（9.6%）、esp B（11.7%）、saa（41.5%）、iha（88.3%）、ecp A（96.8%）、ehx A（80.9%）、kat P（22.3%）和sub AB（44.7%）,呈现20种毒力谱,以牛源毒力谱最为丰富（14/20,70%）;O-血清群检测结果显示,分离株含9个血清群,分别为O146（n=14）、O22（n=7）、O3（n=4）、O168（n=4）、O8（n=3）、O167（n=2）、O88（n=1）、O112ab（n=1）和O147（n=1）。（3）94株STEC中有14株（14.9%）为耐药菌,对头孢他啶、四环素、头孢噻肟、氨苄西林和氨曲南的耐药率在3.2%～5.3%,对复方新诺明、头孢吡肟、哌拉西林-他唑巴坦、氨苄西林-舒巴坦、阿莫西林-克拉维酸和多黏菌素B的耐药率在1.1%～2.1%。依据节点连接单个分离株或分离株群的相似度大于80%将菌株判定为同一型别原则,牛、羊和腹泻人源STEC株在同一簇中。结论:牛、羊和骆驼均是非O157 STEC的储存库,且携带丰富的毒力因子,具有多种血清群,存在感染人类的风险,应在屠宰加工过程中予以预防和控制。
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