【摘 要】
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该文采用从树突状细胞cDNA文库中分离得到的人C1qA链cDNA,通过PCR在其两端添加XhoⅠ、HindⅢ、酶切位点,以它作为目的基因,置于BamHI、HindⅢ、切得的PDGF启动子的调控之下,
【出 处】
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中国协和医科大学 北京协和医学院 中国医学科学院 清华大学医学部
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该文采用从树突状细胞cDNA文库中分离得到的人C1qA链cDNA,通过PCR在其两端添加XhoⅠ、HindⅢ、酶切位点,以它作为目的基因,置于BamHI、HindⅢ、切得的PDGF启动子的调控之下,然后和经BgⅢ、XhoI酶切去除CMV启动子的pCEP4载体首尾"粘-粘"连接,形成重组子.神经元特异性表达的人ClqA链转基因片段由PDGF启动子、人ClqA和cDNA和SV40的poly A顺序组成.为了检测人ClqA链转基因片段的有效性表达,该文采用FuGene6的"boosting"转染法将其导入原代培养的大鼠神经元,然后用RT-PCR检测其表达.结果在该实验条件下未检测到表达,这可能与神经元的低转染效率有关.人ClqA链转基因片段正在转基因小鼠制作中.
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