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作为一种广泛种植的经济作物,花生在发展中国家主要用于榨取食用油,在西方发达国家,则主要用于加工食品。油酸和亚油酸均属不饱和脂肪酸,是花生脂肪酸的主要成分。高油酸花生及其制品不仅货架寿命长,而且更加有益健康。高油酸花生不仅能降低心脑血管疾病风险、增加胰岛素敏感性,还具有抗炎、抗癌作用。因此,高油酸育种已成为当前花生品质改良的主要方向之一。本研究建立了优化的花生脂肪酸气相色谱检测技术,构建了花生近红外品质检测模型,并利用genefishing技术分离高油酸突变体相关基因,为今后花生高油酸育种的顺利开展奠定了基础。主要研究内容和结果包括以下几个方面:1、研究了不同的样品处理量、稀释倍数、升温程序等因素对气相色谱法测定花生脂肪酸的影响,将花生脂肪酸的检测过程和参数进行了优化,大幅减少了利用气谱法测定花生脂肪酸的取样量,节省了检测时间。取样量5mg,经甲酯化处理,吸取上清液与一定体积石油醚稀释,稀释倍数为2X(V/V),气相色谱程序为210。,9min;20。/min升至230。,保持8min,取得了20mg取样量、采用前人报道的气相色谱程序一样的分析结果。用不同油酸含量的花生材料进行了大量平行性试验,统计结果显示具有很好的准确性和重复性。2、选取了四个高油酸花生品种和普通花生品种的杂交组合F2代种子以及新鲜花生种子为实验材料,成功地构建了油酸、亚油酸、棕榈酸、4种有害脂肪酸、Ⅳ、U/S和含水量7个近红外模型。模型的R2分别达到94.67、95.72、86.36、83.71、94.90、73.53和93.62,RMSECP分别为2.52、1.91、0.60、0.67、1.57、0.27、1.17。其中油酸、亚油酸、Ⅳ和含水量4个模型R2均在90以上,RMSECP较小,说明模型质量较高。棕榈酸和有害脂肪酸模型的R2在80以上,基本可以满足近红外分析的要求。U/S模型的质量偏低,R2为73.52。通过对模型预测能力的验证得到各个模型的预测偏差和相对误差,预测偏差分别为-4.399~4.838、-2.011~1.874、-1.247~1.438、-1.634~1.420、-2.231~3.733、-0.533~1.396、-1.781~1.902,预测相对误差分别为0.562~9.687、0.055~7.010、0.642~12.72、0.636~11.464、0.217~4.145、1.582~17.934、0.122%~2.855%。验证结果表明油酸、亚油酸、棕榈酸、Ⅳ和含水量模型整体质量较高;U/S和有害脂肪酸的原始数值小,变幅很窄,模型尚需进一步完善。本研究首次建立了花生脂肪酸的U/S、Ⅳ模型和含水量模型,为花生脂肪酸性状的遗传改良提供了选择工具。3、以鲁丰2号及其高油酸突变植株的种子为材料,提取总RNA,并以其为模板采用genefishing技术筛选到差异表达的cDNA片段17个。片段的大小为105bp-665bp之间。将所得的序列通过BLAST2G0分析,发现大部分序列与数据库提供的基因有较高的相似性。功能主要涉及抗逆,抗病等方面,没有分离到与高油酸表达有密切联系的基因。还有10个序列功能不明确,暂时无法确定功能,需要进一步研究确定。