目的:舌鳞状细胞癌是口腔最常见的恶性肿瘤之一,侵袭力强,转移率高,严重威胁着人类健康。近30年来,为了提高舌鳞状细胞癌的治愈率,口腔学者们进行了大量的研究和多方面的尝试,但五年生存率仍不足50%。分子肿瘤学的深入发展使人们认识到癌变的发生是由于调控细胞生长与死亡的分子信号在从细胞表面向核内转导的过程中发生了异常,导致细胞生长失去了正常调控,以这些病变环节为靶点的药物有望成为高效低毒的新型抗癌药物。研究发现,上皮型黏附分子E-钙粘素在舌鳞状细胞癌的发生和发展过程中发挥着重要作用,其表达下调与舌鳞状细胞癌的组织分化、侵袭、转移及预后密切相关。E-钙粘素能够抑制肿瘤细胞和宿主细胞产生基质金属蛋白酶,从而阻止肿瘤细胞周围基质中的各种蛋白成分以及基底膜降解,最终抑制肿瘤细胞突破基质和基底膜的屏障。E-钙粘素表达缺失或降低可以促进肿瘤细胞的侵袭和转移能力。但目前E-钙粘素表达下调的原因及其影响舌鳞状细胞癌发生发展的具体机制还不清楚。本研究通过建立舌鳞状细胞癌动物模型,收集舌黏膜癌变过程中各阶段的组织标本,检测标本中E-钙粘素mRNA的相对表达量,明确舌黏膜癌变过程中E-钙粘素mRNA是否发生了变化以及变化发生的具体阶段。为研发以这些病变环节为靶点的抗舌鳞状细胞癌的药物提供实验依据。方法:采用4NQ0饮水法诱导SD大鼠舌鳞状细胞癌发生,收集舌鳞状细胞癌发生过程中正常舌黏膜上皮、上皮单纯增生、轻度上皮异常增生、中度上皮异常增生、重度上皮异常增生和鳞状细胞癌阶段的组织标本。将收集到的组织标本分为两部分,一部分用质量分数为4%的多聚甲醛固定,乙醇梯度脱水,石蜡包埋,切片后进行HE染色,请两位有经验的病理科医师读片并进行病理分级;另一部分组织标本在液氮中速冻后转移至-80℃冰箱冷藏。采用实时荧光定量PCR技术获得各阶段组织样本中E-钙粘素基因相对于内参基因β-actin的ΔCT值,进而通过求得2-ΔΔCT值计算各阶段病变组织中相对于正常组织中E-钙粘素mRNA的表达量,从而明确舌鳞状细胞癌发生过程中E-钙粘素在翻译水平是否发生了变化和变化发生的具体阶段。结果:采用4NQO饮水法成功诱导了 SD大鼠舌鳞状细胞癌的发生和发展。观察到在饮用4NQO溶液8周后大鼠舌黏膜开始出现白色斑点或斑片,随着用药时间的延长在相同病变区域出现乳头状瘤或溃疡。至实验结束共收集到82个舌黏膜组织标本,其中有21个上皮正常标本、21个上皮单纯增生标本、14个轻度上皮异常增生标本、8个中度上皮异常增生标本、2个重度上皮异常增生标本、16个高分化鳞状细胞癌标本。用实时荧光定量PCR方法最终成功检测到57个组织标本中E-钙粘素mRNA的相对表达量,其中上皮正常标本10个、上皮单纯增生标本15个、上皮轻度异常增生标本11个、上皮中度异常增生标本3个、上皮重度异常增生标本2个、高分化鳞状细胞癌标本16个。统计发现上皮正常组ΔCT值的平均值为0.53,上皮单纯增生组ΔCT值的平均值为1.05,轻度上皮异常增生组ΔCT值的平均值为3.53,中、重度上皮异常增生组ΔCT值的平均值为3.81,鳞状细胞组ΔCT值的平均值为3.50。除上皮单纯增生组外,其余各组与上皮正常组进行两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。且轻度上皮异常增生组、中度和重度上皮异常增生组、鳞状细胞癌组与单纯增生组进行两两比较,差异也均有统计学意义(P<0.05)。取上皮正常组2-ΔΔCT值为1,计算得到其余各病变组2ΔΔCT值分别为0.70、0.12、0.10、0.12。即上皮单纯增生组、轻度上皮异常增生组、中度和重度上皮异常增生组、鳞状细胞癌组标本中E-钙粘素mRNA表达量分别是上皮正常组标本中的0.70倍、0.12倍、0.10倍、0.12倍。结论:1.采用4NQO饮水法可以诱导SD大鼠舌黏膜癌变的发生,诱导形成的舌鳞状细胞癌主要为高分化鳞状细胞癌。2.在SD大鼠舌高分化鳞状细胞癌发生过程中,上皮由轻度异常增生向鳞状细胞癌转变的时间十分短暂。3.在SD大鼠舌黏膜癌变过程中,E-钙粘素在翻译水平发生了变化,且随着病理分级的增加E-钙粘素mRNA的表达量呈逐渐减少的趋势。4.E-钙粘素mRNA表达变化是SD大鼠舌黏膜癌变过程中的早期事件。