草果黄酮的分离提取及其抗紫外损伤和抗秀丽线虫衰老的生物活性研究

来源 :华南理工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xuxuanxxd
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
草果(Amomum tsaoko Crevost et Lemarie)属于姜科豆蔻属草本植物,尽管对其研究不少,但主要集中在草果挥发油,对黄酮类活性物质的实验研究相对匮乏。本课题通过对草果黄酮进行分离纯化得到了草果总黄酮(ATT)、粗黄酮(ATC)和纯化黄酮(ATP),在对比了三者的多种药理活性作用的基础上,着重对ATT、ATC、ATP的抗紫外损伤及抗衰老活性进行了探究,主要研究内容和结果如下:(1)通过响应面法优化草果黄酮的最佳提取工艺为:提取温度90.33℃,液料比10.32 m L/g,乙醇浓度69.64%,黄酮得率18.02%。对此条件稍作调整后进行ATT的提取,含量为17.95%,通过乙酸乙酯萃取ATT得到含量为50.07%的ATC,以HPD300大孔树脂进一步纯化得到ATP,含量为90.13%。采用傅里叶红外光谱、液相色谱质谱联用的方法分析并鉴定出ATC与ATP中共9种黄酮成分,其中包括7种共有成分。(2)利用胞外胞内模型对ATT、ATC和ATP进行了多种药理活性评价。胞外实验表明三者均具有显著的抗氧化效果(P<0.01),并对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶活力具有较好的抑制作用,ATC活性最强。在确定了ATT、ATC和ATP对L02和RAW264.7细胞安全浓度的基础上,评价了其免疫增强活性,免疫增强能力顺序为:ATC>ATP>ATT。抗癌研究显示草果黄酮对MCF7和MDA-MB-231乳腺癌细胞的增殖无抑制作用。此外,紫外损伤Ha Ca T细胞模型中,ATT、ATC和ATP均可不同程度地提高紫外损伤后Ha Ca T细胞的存活率,且50μg/m L的ATC组细胞存活率为模型组细胞存活率的1.76倍,表现出较强的抗紫外损伤活性,有必要对其作用机制做进一步研究。(3)探究了草果黄酮抗紫外损伤活性与降低细胞氧化应激水平的相关性。胞内抗氧化能力评价和ROS水平测定的结果表明抗氧化能力排序为:ATC>ATP>ATT,说明草果黄酮在胞内具有较好的抗氧化能力。进一步测定了样品对CAT、GSH-Px、SOD、MDA、MMP-1以及TNF-α含量的影响,结果表明,ATC对提高SOD活力和降低MDA、MMP-1、TNF-α水平的效果最好,ATP在提高CAT和GSH-Px水平方面表现最好,ATT提高抗氧化酶活力和降低氧化产物生成的作用最弱。此外,为验证草果黄酮的抗紫外损伤活性,并确定抗损伤可能的活性成分,将鉴定的9种草果黄酮成分与中药信息平台筛选的有效活性成分汇总,同MMP-1、TNF两个蛋白大分子进行分子对接,综合结合自由能和相互作用能力来看,结果表明ATT、ATC和ATP中2’,4,4’-trimethoxychalcone和(-)-儿茶素成分与MMP-1和TNF结合活性较强,其中ATC中含有的(-)-儿茶素可能是其抗紫外损伤活性优于ATP的原因之一。(4)以秀丽隐杆线虫为生物模型,从抗应激胁迫能力和提高线虫运动能力评估了ATT、ATC和ATP的抗衰老活性。分别将秀丽线虫置于百草枯、35℃条件下培养,以建立线虫的氧化应激、热应激胁迫模型,结果表明ATT、ATC和ATP能显著提高热应激、氧化应激线虫的存活率,但三者作用效果无太大差异。此外,ATC和ATP能显著提高线虫第3、6、9天的身体弯曲频率,ATT在第6、9天能显著提高线虫身体弯曲频率。进一步测定了衰老线虫体内的氧化应激水平,结果表明草果黄酮处理组可显著降低线虫体内ROS水平并提高SOD、CAT、GSH-Px活力,说明ATT、ATC和ATP的抗衰老活性可能与降低衰老线虫体内的氧化应激水平有关。另外,对草果黄酮处理后的线虫进行了SKN-1和DAF-16下游靶基因表达量的测定,结果显示ATP能显著增加gst-10的表达,ATT、ATC和ATP均能不同程度地提高sod-3和ctl-1的表达,这提示ATT、ATC和ATP可通过提高SKN-1和DAF-16下游靶基因的表达来发挥抗衰老活性。
其他文献
在当前互联网信息内容治理领域,以“清朗”行动为代表的各类专项行动已经成为相关部门开展治理工作的主要方式,而既有研究并未揭示出其区别于传统运动式治理的主要特征。基于对“清朗”专项行动案例资料的分析,本研究将此类互联网领域运动式治理的新特征归纳为三点,分别是治理周期与治理主体的常态常规化、资源整合主体外部化以及属地管理权变化。为了与传统运动式治理进行区分,本研究称之为“互联网型运动式治理”并对其进行了
期刊
金属锂作为负极的全固态锂离子电池由于具有极高的理论容量与安全性能,被誉为最具应用前景的下一代储能设备。然而,目前的全固态锂离子电池存在固态电解质离子电导率低、机械性能差、以及电解质与电极界面阻抗大等问题,严重限制了其发展与应用。针对上述问题,本文尝试制备了多孔的聚四氟乙烯膜(e PTFE)增强的有机-无机复合固态电解质膜,并采用活性物质浆料直接涂膜技术制备了正极与电解质一体化集合体,制得的电解质膜
学位
光电化学材料广泛应用于光电化学能量转换与储存等领域,其中高性能的光电极是重中之重,对光电极进行界面调控和材料复合可以有效提高其光电化学性能,也是目前研究的重要方向。光电极工作过程中,半导体材料受到光激发产生电荷后进行传输,并采用透明导电氧化物(TCO)作为基底收集电荷。目前n型TCO基底例如掺杂氟的Sn O2导电玻璃(FTO)和氧化铟锡(ITO)已经商业化应用,但这类基底与p型半导体材料及部分n型
学位
牛肉肌原纤维蛋白的凝胶化过程对形成牛肉丸优良口感具有关键作用,而加热方式对牛肉肌原纤维蛋白热诱导凝胶特性有很大影响。目前牛肉丸的主要加热方式是水浴直接加热,即直接升温到熟化温度的一段式加热,但由于蛋白变性不充分,形成的凝胶结构不佳,导致了凝胶硬度、弹性和持水性差的问题。二段式加热是一种先在低温时保温再高温熟化的加热方式,有利于蛋白充分变性,但存在耗时长、能耗高的问题。微波技术具有快速加热的优势,并
学位
质子交换膜燃料电池技术(PEMFC)因其能量转换效率高、能量/功率密度高、安全以及零排放等优势在众多新能源技术中脱颖而出,受到各国的重视与开发,在交通运输、固定式/便携式电源领域极具发展前景。然而,由于需要使用价格高昂的贵金属催化剂,以及燃料电池在苛刻工况下的衰减,PEMFC的大规模商业化应用仍然面临着高成本与耐久性不足的技术挑战。基于此,本文以商业铂碳为研究对象,探索研究了催化剂及膜电极的耐久性
学位
油脂加工淀粉是一类主要通过干法加热制备且具有优良特性的新型改性淀粉,目前在日本已实现工业化生产。然而目前有关淀粉和脂质相互作用的研究主要集中在淀粉糊化后和脂质形成的淀粉脂质复合物及其相关性质,对低水分含量下淀粉脂质相互作用的研究还十分有限。同时,紫外线辐射处理作为一种物理改性方式,能够对淀粉和油脂的性质及其相互作用产生影响,有望应用于油脂加工淀粉的生产。因此,本文探究了干热处理,紫外处理以及干热紫
学位
质子交换膜燃料电池作为一种清洁、高效的能量转换装置,未来在出行、储能等领域有极大的商业应用价值。然而,目前广泛使用贵金属铂作为阴极氧还原反应(ORR)的催化剂,由此而引起的燃料电池成本过高、催化剂容易中毒失活等问题阻碍了质子交换膜燃料电池的大规模商业运用。完全不使用贵金属的过渡金属与氮共掺杂的碳材料催化剂近年来得到了科学界的极大关注。这类催化剂若能得到应用,可以大幅度降低燃料电池的成本,有效促进燃
学位
海参是我国传统的药食两用珍稀海产品,含有多种营养与活性成分。近年来的研究表明,海参蛋白和多肽具有抗氧化、抗衰老等多种活性,在延缓衰老及相关疾病进程方面具有潜在的应用价值。其中,以蛋白聚集为特征的神经退行性疾病与氧化胁迫、衰老过程等密切相关。因此,本文以秀丽线虫(Caenorhabditis elegans)为模型,在前期工作基础上选择抗氧化海参多肽Aj P-F探讨其抗蛋白聚集及相关活性,并进一步通
学位
淀粉基材料用于构建食源性活性成分的包封和运输载体是近年来的一大研究热点,然而氧化淀粉作为淀粉基材料还存在包埋率低、热稳定性差的问题。原花青素(Procyanidins,PC)是一种常见的食源性活性成分,因其稳定性差、生物利用度低的问题而常被作为研究包封和运输的对象。本课题从淀粉的复合改性出发,通过优化设计实验制备得到一种羧基含量高的氧化淀粉,以此为材料制备的氧化交联淀粉凝胶具有良好的吸附包埋效果、
学位
怀集黄菜是广东省肇庆市怀集县出产的一种发酵腌酸菜,它以夏秋季种植了六十日的早熟萝卜苗全株为原料,经腌制发酵而得,具有独特的色泽和口感。论文选取了当地具有代表性的加工厂和农户的自然发酵黄菜样品,测定了其基本理化指标如p H、总酸、水分和水分活度、亚硝酸盐、氨基酸态氮,以及色度、剪切特性、有机酸、游离氨基酸和挥发性风味物质,并进行了感官评价,分析了自然发酵黄菜的特征。通过扩增子测序和宏基因组测序对自然
学位