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芽孢杆菌（Bacillus）是一类产芽孢、好气或兼性厌氧的革兰氏阳性杆状菌,拥有稳定性好、抗逆性强、复活率高等优点[1],能够产生蛋白酶、淀粉酶等大分子物质以提高宿主的消化机能,促进营养物质的消化与吸收[2]。自20世纪80年代,随着海水鱼生殖调控和苗种繁育技术的突破,海水鱼养殖产业得到了突飞猛进的发展。但在发展的过程中,病害频发等问题日益突出,严重制约了海水鱼养殖产业的健康发展。从海水鱼肠道内分离芽孢杆菌等益生菌,对于研制有效的微生态制剂以提高海水鱼的抗病能力具有重要意义。本研究主要介绍从海捕野生蓝点马鲛（Scomberomorus niphonius）、许氏平鲉（Sebastes schlegelii）、梭鱼（Sphyraenus）和鲐鱼（Scomber japonicus）肠道内分离、筛选和鉴定芽孢杆菌的过程,并开展了芽孢杆菌在许氏平鲉和大菱鲆（Scophthalmus maximus）养殖中的应用研究,以此为海水鱼用芽孢杆菌微生态制剂的开发及其在养殖业上的进一步应用提供数据参考。1.海水鱼肠道芽孢杆菌的分离鉴定及特性分析本研究从4种海水鱼肠道中共分离出37株菌种,经过革兰氏阴阳性鉴定初步筛选出9株目的菌;对其进行产酶特性分析及动物安全性评价,最终筛选出1株目的菌株,命名为YB1;基于形态学观察、生理生化特性检测及16S rDNA序列比对分析将其鉴定为蜡样芽孢杆菌;并探究了温度、NaCl含量和pH对其生长的影响。YB1菌落形态凸起,呈白色,表面粗糙,边缘不规整,有褶皱,显微镜下观察呈杆状;其革兰氏染色为阳性,具有良好的产蛋白酶和淀粉酶的特性,在低于108 CFU/mL浓度下对许氏平鲉和大菱鲆是相对安全的。YB1的适宜生长条件为温度1535℃、pH59、NaCl含量05%,在温度35℃、pH7、NaCl含量为0时生长状况最佳。2.蜡样芽孢杆菌YB1在海水鱼养殖中的应用研究本研究通过饲料中添加不同浓度蜡样芽孢杆菌YB1投喂许氏平鲉和大菱鲆幼鱼的方式开展了海水鱼养殖应用评价研究。实验设置3个投喂浓度梯度实验组和1个空白对照组,分别标记为E-L（105 CFU/mL）、E-M（106 CFU/mL）、E-H（107CFU/mL）、C（0 CFU/mL）,许氏平鲉在组别前加标H,大菱鲆在组别前加标D,实验周期为50d;通过分析增重率、特定生长率及饲料系数等生长指标,测定蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶等肠道消化酶活力以及丙二醛、超氧化物歧化酶和过氧化氢酶等肝脏免疫酶活力,并探究YB1对肠道组织结构的影响,揭示YB1对许氏平鲉和大菱鲆幼鱼的益生作用。饲料中添加YB1投喂许氏平鲉幼鱼的实验结果显示,H-E-L组、H-E-M组和H-E-H组的增重率和特定生长率均高于H-C组,且H-E-L组、H-E-H组与H-C组之间存在显著性差异,H-E-L组、H-E-M组和H-E-H组的饲料系数均低于H-C组。说明蜡样芽孢杆菌YB1可以显著提高许氏平鲉幼鱼的增重率和特定生长率,降低饲料系数,起到促进生长的作用。H-E-L组、H-E-M组和H-E-H组的肠道淀粉酶活力和脂肪酶活力均高于H-C组,H-E-L组和H-E-H组的蛋白酶活力高于H-C组;H-E-L组、H-E-M组和H-E-H组的肝脏MDA含量均低于H-C组,H-E-M组和H-E-H组的SOD和CAT活力高于H-C组;说明蜡样芽孢杆菌YB1对许氏平鲉幼鱼肠道蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶活力和肝脏超氧化物歧化酶、过氧化氢酶酶活力的提高具有一定的促进作用。H-E-L组、H-E-M组和H-E-H组的许氏平鲉幼鱼肠黏膜皱襞高度、肌层厚度以及肠道褶皱量均较H-C组高,说明芽孢杆菌YB1可以改善许氏平鲉的肠道组织结构。饲料中添加YB1投喂大菱鲆幼鱼的实验结果显示,D-E-L组、D-E-M组和D-E-H组的增重率和特定生长率均高于D-C组,其中D-E-H组最高,且与D-C组存在显著性差异,D-E-L组、D-E-M组和D-E-H组的饲料系数均稍高于D-C组,但与D-C组之间无显著性差异,说明YB1对大菱鲆幼鱼的生长具有一定的促进作用。D-E-M组的肠道蛋白酶和淀粉酶酶活力最高且显著高于D-C组,D-E-L组的脂肪酶活力最高且显著高于D-C组;D-E-L组、D-E-M组和D-E-H组的MDA含量均低于D-C组,其中D-E-M组的最低且与D-C组之间存在显著性差异,D-E-L组和D-E-H组的SOD和CAT活力均高于D-C组。说明YB1对大菱鲆幼鱼肠道消化酶活力和肝脏抗氧化酶活力的提高具有显著促进作用。D-E-L组、D-E-M组和D-E-H组的大菱鲆幼鱼肠黏膜皱襞高度、肌层厚度以及肠道褶皱量均较D-C组高,说明芽孢杆菌YB1对大菱鲆肠道组织结构具有改善作用。