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目的：研究二烯丙基二硫（DADS）及LIMK1高表达对人结肠癌SW480细胞细胞生物学特性的影响，观察DADS和LIMK1对裸鼠体内SW480细胞成瘤的影响，探讨DADS抑制SW480细胞增殖、迁移与侵袭的分子机制。方法：构建含有编码人LIMK1蛋白的LIMK1基因CDS序列的PIRES2-LIMK1真核表达载体。将PIRES2-LIMK1真核表达载体转染SW480细胞，建立LIMK1蛋白高表达稳定转染细胞LIMK1/SW480细胞。RT-PCR、Westernblot检测DADS处理前后，LIMK1高表达对SW480细胞LIMK1mRNA及蛋白表达。MTT法、流式细胞术、划痕实验和Transwell侵袭实验检测DADS处理前后，LIMK1高表达对SW480细胞增殖、细胞周期、迁移和侵袭能力的影响。裸鼠皮下注入SW480细胞、LIMK1高表达细胞、LIMK1干扰细胞分别体外未处理和DADS处理24h后，建立人结肠癌异种移植模型。观察移植瘤生长情况，测量重量与体积，计算抑瘤率，免疫组化分析Vimentin、P53、Ki-67、CD34、E-cadherin蛋白表达。结果：1．成功构建LIMK1蛋白高表达稳定转染LIMK1/SW480细胞。酶切和测序结果证实，成功构建PIRES2-LIMK1真核表达载体。PIRES2-LIMK1真核表达载体转染SW480细胞，经G418刷选2周后，免疫荧光显微镜下示转染细胞的胞浆内发绿色荧光，RT-PCR和Western blotting检测显示，LIMK1/SW480细胞中LIMK1mRNA和蛋白表达量增高（P<0.05），提示成功获得LIMK1高表达的稳定细胞株LIMK1/SW480。2．DADS可下调LIMK1mRNA和蛋白表达，可抑制LIMK1和cofilin1的磷酸化，LIMK1过表达可促进cofilin1的磷酸化。RT-PCR和Western blot检测显示， LIMK1过表达组、空载体组、SW480组分别加入45mg· L-1DADS作用24小时后，LIMK1mRNA和蛋白表达量明显降低（P<0.05），p-LIMK1和P-cofilin1明显减少（P<0.05）。Western blotting检测显示，LIMK1过表达组P-cofilin1明显高于空载体组及SW480组（P<0.05）。Western blot显示，DADS及LIMK1过表达对SW480细胞cofilin1的表达差异无统计学意义（P>0.05）。3．DADS可抑制SW480细胞的增殖、迁移与侵袭，LIMK1过表达可促进SW480细胞的增殖、迁移与侵袭。MTT结果显示，LIMK1高表达组增值活性明显高于SW480组及空载体组（P<0.05），加DADS处理后，LIMK1高表达组、SW480组及空载体组细胞增值活性均受到抑制（P<0.05）。划痕实验结果显示，划痕24h后，LIMK1高表达组愈合明显快于SW480组及空载体组（P<0.05），加DADS处理后，LIMK1高表达组、SW480组及空载体组细胞划痕愈合速率均受到抑制（P<0.05），表明LIMK1过表达可促进细胞的迁移能力，DADS可抑制SW480细胞的迁移能力。Transwell实验结果显示，Transwell小室培养细胞24小时后，LIMK1高表达组穿膜细胞数明显多于SW480组及空载体组（P<0.05），加DADS处理后，三组穿膜细胞数均明显减少（P<0.05），表明LIMK1过表达可增强SW480细胞的侵袭能力，DADS可抑制SW480细胞的侵袭能力。4．DADS可抑制人结肠癌SW480细胞裸鼠移植瘤的生长，LIMK1过表达可促进裸鼠移植瘤的生长，沉默LIMK1可抑制裸鼠移植瘤的生长。实验结果表明，DADS处理后SW480细胞，其移植瘤生长明显受抑制（P<0.05），LIMK1过表达组裸鼠移植瘤生长明显快于SW480组及干扰组（P<0.05），沉默LIMK1后，其裸鼠移植瘤生长明显慢于SW480组及LIMK1过表达组；免疫组织化学图像分析结果显示，高表达LIMK1处理SW480组的Vimentin、P53、Ki-67、CD34蛋白的阳性表达（棕黄色颗粒）均明显增高，E-cadherin蛋白的阳性表达明显减少；DADS处理与干扰LIMK1蛋白的表达都对结肠癌细胞裸鼠移植瘤Vimentin、P53、Ki-67、CD34蛋白表达有抑制作用，而能增加E-cadherin的表达（P<0.05）。结论：1．LIMK1过表达可促进SW480细胞的增殖、迁移与侵袭，减弱DADS的抑制作用，与促进cofilin1磷酸化有关。2．DADS抑制人结肠癌SW480细胞的增殖、迁移与侵袭与下调LIMK1及cofilin1磷酸化有关。3．DADS可抑制SW480细胞裸鼠移植瘤生长，LIMK1过表达可促进移植瘤生长，沉默LIMK1可阻碍移植瘤的生长。4．DADS及沉默LIMK1可降低Vimentin、P53、Ki-67、CD34表达，增加E-cadherin表达，而LIMK1过表达的作用相反。