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目的体外探究β-TCP材料浸提液对T淋巴细胞的免疫调节作用,并研究此免疫调节作用对于小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化能力的影响,为将来临床上更好地修复再生口腔领面部骨缺损提供一定的理论基础。方法使用化学沉淀法合成β-TCP材料,制备成不同梯度浓度的β-TCP材料浸提液。将β-TCP材料浸提液与小鼠脾脏T淋巴细胞共同培养,分别在第12h,24h,48h和72h采用CCK8法进行细胞活性检测,在培养第72h进行台盼蓝染色观察。细胞培养4天后,分别采用流式细胞技术和细胞激光共聚焦法检测β-TCP材料浸提液诱导磁珠分选的CD4+T分化成Th17亚群细胞的效果,并收集此培养条件下的上清液,进行酶联免疫吸附反应(ELISA)检测上清液中IL-17A的分泌量。使用收取的不同浓度β-TCP材料浸提液与T淋巴细胞作用后的上清液再培养小鼠BMSCs,在第14天和第21天分别采用qRT-PCR和Western Blot技术检测成骨分化相关标志物碱性磷酸酶(ALP)和骨钙素(OCN)的表达,并在第21天分别进行ALP和茜素红染色,观察小鼠BMSCs成骨分化的效果。同时,与小鼠BMSCs培养时,在收集的β-TCP材料浸提液与T淋巴细胞作用后的上清液中加入IL-17A中和抗体,培养第21天,采用qRT-PCR技术和Western Blot技术检测成骨相关标记物ALP和OCN表达,同时采用ALP和茜素红染色法观察小鼠BMSCs成骨分化能力的改变情况。数据结果使用SPSS 16.0进行统计分析,结果表示为均数±标准差(x±s)形式,P<0.05表示差异具有统计学意义。结果细胞活性实验显示,浓度为0～50mg/ml的ββ-TCP材料浸提液对T淋巴细胞的增殖无影响,浓度为100～200mg/ml时,对T淋巴细胞增殖具有明显细胞毒性。流式细胞技术和细胞激光共聚焦实验表明,β-TCP材料浸提液能够诱导CD4+T细胞向Th17亚群分化,且当β-TCP浸提液的浓度为25 mg/ml时,诱导分化出的Th17亚群细胞比例最高(P<0.05);检测该浓度组上清液中IL-17A分泌量也最高(P<0.05)。同时25mg/mlβ-TCP浸提液对T淋巴细胞作用后的上清液中,Th17细胞分泌的IL-17A诱导小鼠BMSCs的成骨分化效果最明显,成骨相关标志物ALP和OCN的表达上调明显高于阴性对照组和0mg/ml组,且强于单独β-TCP材料浸提液组,差异有统计学意义(P<0.05)。ALP和茜素红染色结果显示,与阴性对照组相比,25mg/ml组阳性染色明显。IL-17A中和实验后,与未中和的上清液组相比,中和后的上清液对小鼠BMSCs的骨向分化作用减弱,ALP和OCN表达均下调,ALP和茜素红的阳性染色区相应减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论体外实验结果表明,25 mg/ml的β-TCP材料浸提液能够诱导T淋巴细胞向Th17亚群方向分化,Th17细胞分泌IL-17A在调控小鼠BMSCs的成骨分化过程中发挥了重要作用,为后期进一步的体内实验奠定基础。