中药蛇六谷提取物对人肝癌HepG2细胞增殖的抑制作用及其机理的初步研究

来源 :浙江中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sunping521
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目的:研究中药蛇六谷经系统溶剂法初步提取分离后,不同提取物对体外培养的人肝癌HepG2细胞增殖的抑制作用,并初步探讨其可能的作用机理。  方法:采用系统溶剂法,以95%乙醇回流提取蛇六谷后,依次以石油醚、乙酸乙酯萃取醇提液,醇提后药渣以水提取,回收各提取试剂后初步得到其不同极性提取物;以MTT法检测其不同提取物对体外培养的人肝癌HepG2细胞增殖的影响;以生长曲线法观察不同提取物抑制人肝癌HepG2细胞的时间-效应曲线;以流式细胞仪检测不同提取物对人肝癌HepG2细胞凋亡的影响。  结果:(1)蛇六谷经乙醇回流提取,石油醚、乙酸乙酯及醇提后药渣水提后得到不同提取物,其得率分别为28.94%、11.46%、5.44%、22.31%;(2)蛇六谷不同提取物对体外培养的人肝癌 HepG2细胞增殖的抑制作用存在一定差异,其中醇提取物、石油醚萃取物和乙酸乙酯萃取物具有一定的抑制增殖的作用,以石油醚萃取物的抑制作用最为明显,其20μg/ml、30μg/ml、40μg/ml、50μg/ml浓度组的细胞增殖抑制率分别为10.8%、25.5%、51.1%、59.9%,与对照组及醇后水提取物组、醇提取物组比较均存在显著差异(P﹤0.01);且增殖抑制作用随剂量的增加而递增,呈现较好的剂量-效应曲线。醇提取物、乙酸乙酯萃取物亦有一定的抑制增殖作用和相关的剂量-效应曲线。醇后水提取物对 HepG2细胞增殖的抑制作用则不明显;(3)生长曲线法观察发现蛇六谷石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物对 HepG2细胞的增殖抑制作用有一定的时间-效应曲线,在药物作用24~48h后抑制作用最为明显;(4)流式细胞仪检测发现蛇六谷石油醚萃取物有一定的诱导HepG2细胞凋亡的作用。  结论:(1)中药蛇六谷经系统溶剂法初提后其醇提取物、石油醚萃取物和乙酸乙酯萃取物具有抑制人肝癌 HepG2细胞增殖的作用,且其作用呈现一定的剂量-效应关系,其中石油醚萃取物抑制作用较为明显;醇后水提取物的细胞增殖抑制作用则不明显;(2)蛇六谷石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物对人肝癌HepG2细胞增殖的抑制作用呈现一定的时间-效应依赖;(3)流式细胞仪检测发现蛇六谷石油醚萃取物有一定的诱导HepG2细胞凋亡的作用。
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