PART I:研究表明应激可以导致糖皮质激素过量分泌并损伤卵母细胞发育能力。我们实验室前期工作发现注射糖皮质激素(皮质醇)同样导致小鼠卵母细胞发育能力下降,但体外成熟过程中添加应激生理浓度的糖皮质激素并不影响卵母细胞的成熟和胚胎的发育。本实验主要通过检测注射皮质醇后小鼠卵母细胞的发育能力,卵巢细胞凋亡情况,Fas/Fas L信号通路的激活来探索糖皮质激素损伤卵母细胞发育能力的具体机制。结果显示注射糖皮质激素(皮质醇)显著降低雌性小鼠(a)卵母细胞发育能力,(b)血清和卵巢中E2/P4的比例,(c)壁颗粒细胞中胰岛素样生长因子1(IGF1)、脑源性营养因子(BDNF)及糖皮质激素受体(GR)的表达。同时显著升高(a)血清和卵巢中皮质醇的含量,(b)壁颗粒细胞和卵丘细胞的凋亡比例,(c)体外成熟培养过程中卵丘细胞分泌的Fas L,(d)壁颗粒细胞、卵丘细胞和卵母细胞中Fas的表达。当给Fas L基因突变小鼠(gld小鼠)注射皮质醇后,发现其卵母细胞发育能力的削弱程度、壁颗粒细胞和卵丘细胞的凋亡比例与野生型相比都有很大幅度的缓解。由此可以得出以下结论:糖皮质激素是通过激活Fas系统导致卵巢细胞凋亡进而损伤卵母细胞发育潜能。到目前为止,本实验是首次揭示糖皮质激素降低卵母细胞发育能力的机制,这将有助于进一步理解糖皮质激素在应激相关疾病中作用。PART II:人类流行病学研究表明产前应激可能会损伤情感发育,增加后代患抑郁症、焦虑症、精神分裂症、自闭症的机率。但是产前应激影响后代行为和神经内分泌系统的机制尚不十分清楚。另外,大多数这方面的研究都集中于妊娠晚期。关于着床前应激对后代影响的研究很少,而有关这方面的体外试验更是缺乏。本实验主要研究着床前心理应激是否影响后代焦虑行为,并且运用体内和体外外两种模型研究后代行为的改变是否是通过应激增加糖皮质激素的分泌引起的。结果表明着床前应激和体外培养胚胎过程中添加糖皮质激素(皮质酮)都可以增加后代焦虑行为,导致后代海马区糖皮质激素受体(GR)和脑源性营养因子(BDNF)的下调,并促进糖皮质激素的分泌。而且体外培养过程中添加皮质酮会下调胚胎内糖皮质激素受体的表达。由此可以得出以下结论:着床前心理应激是通过促进妊娠母鼠糖皮质激素的分泌,进而引起胚胎内糖皮质激素受体表达下降,最终导致后代焦虑水平上升。本研究是首次报道着床前应激和体外培养胚胎时添加糖皮质激素会增加后代的焦虑行为,这些实验结果可以帮助我们进一步理解产前应激影响后代行为的具体机制。