【目的】研究静脉麻醉药咪达唑仑对人精子运动功能的影响及其可能机制。【方法】正常精液标本经percoll密度梯度法离心优选后沉淀以HTF培养基重悬，分为咪达唑仑组和对照组，咪达唑仑组根据药物浓度不同分为高浓度组M100（100μg/ml）、M50（50μg/ml）和临床相关浓度组M5（5μg/ml）、M1（1μg/ml），对照组C加入生理盐水，在10、30、60min三个时间点取各组精子悬液以计算机辅助精液分析系统（CASA）分析精子运动参数,包括活力（以a级+b级精子百分数表示），曲线速率（VCL），直线速率（VSL），平均路径速率（VAP），精子头侧摆幅度（ALH），鞭打频率（BCF），直线性（LIN），摆动性（WOB），前向性（STR）和平均角位移（MAD）。为研究咪达唑仑影响精子运动功能是否通过GABAA受体起作用，使用GABAA受体阻断剂荷苞牡丹碱和受体偶联氯通道阻断剂印防己毒素干预高浓度咪达唑仑的作用。分为（1）咪达唑仑组M：加入终浓度为100μg/ml咪达唑仑；（2）干预剂组M+P，M+B：分别预先加入50μg/ml荷苞牡丹碱和100μg/ml印防己毒素孵育15min，再加入终浓度100μg/ml咪达唑仑；（3）干预剂对照组P，B：分别仅加入50μg/ml荷苞牡丹碱和100μg/ml印防己毒素；（4）对照组C：加入生理盐水。30min使用CASA检测各组精子运动参数。【结果】1.10、30、60min，与对照组及临床浓度组比较，高浓度组精子活力及一些运动参数下降，差异有统计学意义（P<0.05），而参数BCF在30,60min升高，差异有统计学意义（P<0.05）；与对照组比较，临床浓度组其精子活力及各项运动参数差异无统计学意义（P>0.05）。2.10、30、60min高浓度组中M100组较M50组精子活力及一些运动参数下降，差异有统计学意义（P<0.05）；临床浓度组中，M5组和M1组之间精子活力及运动参数差异无统计学意义（P>0.05）。3.同一浓度咪达唑仑作用的精子在各时间点活力及运动参数差异无统计学意义（P>0.05）。4.受体阻断剂干预实验：与对照组比较，咪达唑仑组、干预组多项运动参数下降，差异有统计学意义（P<0.05）,但干预组各项参数较咪达唑仑组差异无统计学意义（P>0.05）。【结论】1.临床浓度咪达唑仑对精子运动功能无显著影响，而高浓度咪达唑仑可呈剂量依赖性抑制精子运动功能；2.高浓度咪达唑仑抑制精子运动可能不通过GABAA受体机制实现。【目的】研究异氟烷对人精子顶体反应的影响及可能机制【方法】1.异氟烷急性暴露处理精子：正常精液标本经percoll不连续密度梯度法离心优选后，沉淀以HTF培养基重悬，调整密度后随机分为麻醉组和对照组，麻醉组置于通入含5%CO₂空气为载体的异氟烷（1.2%，2.4%）的密闭容器中，容器置于37°C温箱中；对照组置于给予5%CO₂空气的37°C细胞培养箱中。培养4小时后，以Hoechst33258和FITC-PSA双标染色评估活精子中发生顶体反应精子的百分数。2.评估异氟烷对精子细胞内钙浓度的影响：正常精液标本经percoll不连续密度梯度法离心优选，沉淀以HTF培养基重悬，调整密度后随机分为麻醉组和对照组，麻醉组置于通入含5%CO₂空气为载体的异氟烷（1.2%，2.4%）的密闭容器中，容器置于37°C温箱中；对照组置于给予5%CO₂空气的37°C细胞培养箱中。处理4小时后，以2μM钙指示剂Fluo-4孵育30分钟，以PBS洗涤两次，加入终浓度5μMPI，以流式细胞仪检测活精子细胞内钙平均荧光强度。【结果】1.1.2%，2.4%异氟烷组和对照组之间精子顶体反应的发生率差异均无统计学差异（P>0.05）。2.1.2%，2.4%异氟烷组精子内钙平均荧光强度较对照组降低，差异有统计学意义（P<0.05）；1.2%和2.4%两组之间差异无统计学意义（P>0.05）。【结论】临床浓度异氟烷作用4小时对人精子顶体反应无明显影响，可能与其降低精子细胞内钙浓度有关。