【摘 要】
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软骨藻酸(DA)作为一种次级代谢产物由部分拟菱形藻所产生,当产毒拟菱形藻受到外界环境影响(例如温度、pH、重金属胁迫)时,DA的产量会大幅度上升。研究表明,金属胁迫促进了产
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软骨藻酸(DA)作为一种次级代谢产物由部分拟菱形藻所产生,当产毒拟菱形藻受到外界环境影响(例如温度、pH、重金属胁迫)时,DA的产量会大幅度上升。研究表明,金属胁迫促进了产毒拟菱形藻属细胞内DA的累积和释放,然而其中的原因却存在争议。为了阐明DA在重金属胁迫当中起到的作用,我们将产毒多列拟菱形藻和非产毒尖刺拟菱形藻暴露在铜胁迫(5μM和9μM)中96小时。研究发现多列拟菱形藻在这两种铜胁迫下可以更好的生长。向培养基中加入DA使得铜胁迫中多列拟菱形藻的细胞内丙二醛(MDA)的含量有所降低,同时DA的加入也降低了过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性。用电感耦合等离子质谱(ICP-MS)对不同形态的铜含量分析发现,9μM铜胁迫中加入DA减少了多列拟菱形藻细胞内和细胞壁上吸附的铜含量,但并未改变海水中游离铜离子的含量。通过液相色谱串联质谱(LC-MS)分析DA的含量,我们发现多列拟菱形藻细胞内DA含量随着铜胁迫的增加而增加,并且9μM铜胁迫下细胞释放的DA增加了 100%。这表明DA不是通过改善铜胁迫下的藻细胞的抗氧化防御系统,也不是通过被藻细胞释放到海水中与铜离子络合来缓解铜胁迫。而对于DA的释放,我们推测原因是它与细胞中的铜形成络合物并被排出以此减少细胞内铜含量。为了研究细胞内累积的DA的功能,我们使用了活性氧(ROS)清除剂N-叔丁基-α-苯基硝酮(BPN),BPN的添加显着降低了细胞内DA的积累,这暗示细胞内的DA具有清除ROS的功能。同时进一步的实验也表明DA的存在可以缓解了多列拟菱形藻受到的过氧化氢的胁迫。这表明产毒拟菱形藻在受到环境所造成的氧化胁迫时可以通过DA来淬灭ROS以达到减轻氧化胁迫的目的。
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