PLA-O-CMC纳米粒子在异种肝细胞移植中的抗免疫排斥作用

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目的:观察胶原凝胶包埋PLA-O-CMC纳米粒子粘附培养的猪肝细胞腹腔内移植对在治疗急性肝衰竭大鼠中对免疫排斥反应的影响。方法:采用聚乳酸与O-羧甲基壳聚糖制备PLA-O-CMC纳米粒子,原位胶原酶循环肝灌注法分离猪肝细胞。分离所得猪肝细胞分3组,分别以5×105 /ml的浓度,接种在含10%新生牛血清、EGF、HGF的RPMI 1640培养液中,其中I组培养液中加入PLA-O-CMC纳米粒子。D-氨基半乳糖(D-Gal)腹腔内注射制作大鼠ALF模型,48h后分别将5mlⅠ型胶原凝胶包埋的PLA-O-CMC纳米粒子粘附培养24h的猪肝细胞(I组)、5mlⅠ型胶原凝胶固定培养24h的猪肝细胞(II组)、5ml培养24h的猪肝细胞悬液(III组)移植到ALF大鼠腹腔内,以上各组各含5.0×107个肝细胞。分别在移植后1d、2d、3d、5d、7d取大鼠血清分别检测IL-2、IFN-γ、IgG、IgM浓度;取腹腔移植物光镜下观察移植物中存活肝细胞情况。结果:I组血清IL-2、IFN-γ、浓度与其它各组相比无显著性差异;各组大鼠血清IgG浓度在移植后开始逐渐升高,第3d达到最高峰,随后逐渐下降。其中II、III两组上升及下降幅度较I组大。各组大鼠血清IgM浓度在移植后第1d即明显低于肝衰模型大鼠,II、III组水平低于I组。第2d各组大鼠血清IgM水平与第1d比基本持平,第3d开始各组IgM水平开始上升,I组上升较快。I组移植肝细胞的存活时间较其它组长。结论: PLA-O-CMC纳米粒子在猪肝细胞移植治疗大鼠急性肝衰竭过程中对免疫排斥反应具有一定的抑制作用。
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