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HBV(Hepatitis B virus)感染是肝癌(Hepatocellular Carcinoma,HCC)高发的最主要原因。研究HBV致病机制的重要途径就是建立方便有效的HBV感染模型。我们前期的研究建立了能使HBV长期稳定表达抗原并复制的HBV HepG2肝癌细胞株RHBV-3,同时获得了空载体细胞株RepSal-1。RepSal-1、REP-HBV细胞株的成功建立为我们研究HBV复制在整体水平对细胞的影响提供了途径。细胞原癌基因(proto-oncogene)与细胞正常功能有关,当发生突变或异常活化时可引起肿瘤发生。目前的研究认为HBV可能通过DNA整合激活原癌基因(顺式活化作用)或其编码的病毒产物反式活化细胞基因发挥致癌作用。另外,基质金属蛋白酶(Matrix Metalloproteinases,MMPs)、基质金属蛋白酶组织抑制因子(tissue inhibitors of metalloproteinases,TIMPs)与恶性肿瘤侵袭转移的关系是研究的热点。有报道发现在整合有HBV DNA的Hep3B细胞及感染HBV的肝癌细胞中MMP9的表达增高,而对TIMPs的影响尚未见报道。因此本研究拟通过对RepSal-1、RHBV-3细胞株中原癌基因、MMPs及TIMPs基因转录表达及酶活性的分析,初步了解HBV在整体水平上对癌相关基因的影响,进而探讨HBV致肝癌的机制及其与肝癌细胞侵袭转移的关系。本研究第一部分通过设计基因特异性引物,应用实时定量PCR(Real-timeQuantitative Polymerase Chain Reaction,RQ-PCR)初步分析HBV对HepG2细胞原癌基因Ras、Jun、Myc、Fos及MMP2、9和TIMP1-4基因转录的影响,结果表明HBV复制促进Ras、Jun、Myc、MMP2、9、TIMP1、3基因转录,抑制TIMP4基因转录。对TIMP2无影响。本研究第二部分通过明胶酶谱检测MMP2、9酶活性。结果显示,HBV能增强MMP2、MMP9的表达和激活。反相明胶酶谱法检测结果显示,HBV增强细胞中TIMP1、TIMP3表达,抑制TIMP4表达。总之,本研究结果表明HBV可影响原癌基因、MMPs、TIMPs的基因转录,这与HBV相关的HCC的发生、发展密切相关。