【摘 要】
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该论文的主要研究内容及结果如下:1.用聚合酶链式反应(PCR)技术并根据基因同源保守序列从草本植物亚洲菜豆、木本植物刺槐、银杏和毛白杨中克隆得到在形成层定位表达的富甘氨
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该论文的主要研究内容及结果如下:1.用聚合酶链式反应(PCR)技术并根据基因同源保守序列从草本植物亚洲菜豆、木本植物刺槐、银杏和毛白杨中克隆得到在形成层定位表达的富甘氨酸结构蛋白基因(GRP1.8)启动子.2.用聚合酶链式反应(PCR)技术并根据基因同源保守序列首次成功地从木本植物毛白杨中克隆得到了木质素生物合成途径中关键酶4-香豆素辅酶A-连接酶1(4CL1)基因及其启动子.3.根据基因同源保守序列、利用RT-PCR技术,首次成功从木本植物毛白杨中扩增得到了木质素生物合成途径中关键酶4-香豆素辅酶A-连接酶1(4CL1)的cDNA序列和DNA序列.4.利用生物信息学知识,使用计算机软件包对该蛋白三维空间结构进行了模拟,成功的得到了该蛋白的理论三维空间结构模型.5.利用基因重组技术,分别将花揶菜病毒启动子(35S)、刺槐GRP1.8启动子、毛白杨4CL1启动子与毛白杨4CL1基因相融合连接,并构建成转基因表达载体35S-4CL1、GRP1.8-4CL1和4CL1p-4CL1.6.通过对4CL1mRNA二级结构的分析,通过PCR技术成功的得到了两个反义基因.将这两个反义基因与35S启动子,刺槐GRP1.8启动子,毛白杨4CL1启动子构建成融合基因,并构建5个表达载体.将这些表达载体分别转化烟草、毛白杨、刺槐,经过抗性筛选,初步得到转基因再生苗.
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