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近年来,人们生活习惯逐渐改变,熬夜等不规律生活的育龄夫妇增多,生育功能下降,流产率增加,因此,熬夜是否影响女性生殖功能需要研究。持续光照雌性小鼠因其昼夜节律紊乱,导致褪黑素的分泌也相应出现紊乱,其卵巢表现为不排卵,可呈现多囊样改变。黄体功能不全(LPD)是女性常见的内分泌疾病之一,也是导致流产的常见病因之一,患病率约5%,主要表现为黄体形成障碍及孕酮分泌不足,常导致月经周期紊乱、不孕症等。褪黑素是松果体分泌的一种激素,具有强大的抗氧化作用,可改善黄体功能。然而,目前对于持续光照是否影响雌性小鼠黄体形成和功能,褪黑素对持续光照雌性小鼠黄体功能有何作用及其作用机制尚不明确。研究目的:探究持续光照对雌性小鼠黄体形成及功能的影响,并探索褪黑素对持续光照雌性小鼠黄体功能的影响机制。研究方法:本实验采用持续光照雌性小鼠模拟熬夜,通过HE观察小鼠卵巢组织的改变,然后进一步通过qRT-PCR、免疫组化及Western-Blot等实验技术进行研究。研究内容:将实验小鼠分为4组:正常光照组、持续光照组、褪黑素1 mg/kg组、褪黑素3 mg/kg组,从造模第15天开始按剂量腹腔注射相应的褪黑素,持续至42天。造模成功后,首先研究了持续光照对雌性小鼠黄体形成及功能的影响;其次研究持续光照对雌性小鼠黄体形成和功能影响的机制;最后研究了褪黑素对持续光照雌性小鼠黄体功能的作用及机制。研究结果:研究结果发现,与正常光照组相比,持续光照组雌性小鼠黄体维持时间显著缩短(P<0.05);血清中孕酮(P)水平显著降低(P<0.001);卵巢中黄体数量显著减少(P<0.01);与黄体形成相关基因(Lhcgr、Star、Ptgfr及Runx2)表达显著下调(P<0.05);与黄体形成相关蛋白(CYP11A1及SFRP4)水平显著降低;节律基因(Clock及Per1)表达显著下调(P<0.05);Mt1表达显著下调(P<0.05);MT1蛋白水平显著降低;腹腔注射hCG 2小时后,卵巢中pERK蛋白水平显著降低。与持续光照组相比,褪黑素3 mg/kg组雌性小鼠黄体维持时间显著延长(P<0.05);血清中P水平显著升高(P<0.001);卵巢中黄体数量显著增多(P<0.05);与黄体形成相关基因(Lhcgr、Star、Ptgfr及Runx2)表达显著上调(P<0.05);与黄体形成相关蛋白(CYP11A1及SFRP4)水平显著升高;节律基因(Clock及Per1)表达上调(P<0.05);Mt1表达上调(P<0.01);MT1蛋白水平显著升高;腹腔注射hCG 2小时后,卵巢中pERK蛋白水平显著升高。结论:持续光照可导致雌性小鼠黄体维持时间缩短、黄体形成数量减少,孕酮分泌降低;持续光照可下调雌性小鼠卵巢中Lhcgr、Star、Ptgfr、Runx2等基因表达,抑制黄体形成、孕酮分泌减少;持续光照可能通过下调雌性小鼠卵巢中节律基因Clock、Per1的表达,并下调Mt1的表达,抑制ERK激活,从而抑制MAPK/ERK信号通路,减少黄体形成;褪黑素可能通过上调Mt1表达,直接或间接激活ERK,从而激活MAPK/ERK信号通路,促进颗粒细胞黄素化,改善节律紊乱导致的黄体功能不全。