阿拉善地区粘细菌的分离鉴定及其抗致病疫霉活性的初步研究

来源 :内蒙古农业大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:hsgnln
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粘细菌(myxobacteria)是一类可滑行的革兰氏阴性细菌,具有种类多样的多细胞行为和复杂的形态发生。近年来,粘细菌作为可以产生多种次级代谢产物的药源微生物而备受关注。本研究采集了38个来自阿拉善地区的土壤样品,并对其理化指标进行了检测。阿拉善地区土壤处于干旱状态,土壤pH值处于中性偏碱性的状态,有机质、水解氮含量比较缺乏,有效磷、速效钾含量较为丰富或适宜。采用滤纸片诱导法、大肠杆菌诱导法、兔粪诱导法,结合子实体直接挑取及抗生素纯化法,诱导分离出118株菌株,纯化出90株,分属于6个属,11个种,分别为:橙色粘球菌、黄色粘球菌、变绿粘球菌、叶柄粘球菌、大孢粘球菌、大孢珊瑚球菌、Pyxicoccus fallax、过渡原囊菌、紫色孢囊杆菌、小孢囊杆菌、囊球粘细菌,粘球菌属为该地区的优势菌属。该地区可培养粘细菌资源与土壤酸碱性呈现出显著正相关,草甸盐土可培养粘细菌种属最为丰富,包括Myxococcus、Cystobacter、Anqiococcus三个菌属,流动荒漠风沙土及各类灰漠土可培养粘细菌菌株数较多;土壤的利用方式对粘细菌的分布有明显影响,林地土壤可培养粘细菌菌株含量高,且种属较多。该地区可培养粘细菌中78.75%的菌株具有不同程度的拮抗马铃薯晚疫病菌活性,选取活性表现突出菌株AL-24和特殊种属菌株AL-10进行后续深入研究。研究表明两株粘细菌除了具有拮抗致病疫霉活性外,还对核盘菌、尖孢镰刀菌和立枯丝核菌三大植物病原菌表现出不同程度的生长干扰活性,为了获得更多的活性物质,对首次进行发酵次级代谢产物研究的囊球粘细菌菌株AL-10进行发酵条件的摸索,最终确定最适发酵培养基为VY/2,树脂添加量为2%,接种量为6%,装瓶量为250mL,发酵时间为5d;对已经确定最适发酵条件的橙色粘球菌菌株AL-24和囊球粘细菌菌株AL-10进行复合发酵条件的摸索,最终确定在橙色粘球菌AL-24单独发酵培养72h后加入微枝形杆菌菌株M-1为辅助菌,发酵培养至第七天的发酵液活性物质抗菌性能最优,而囊球粘细菌AL-10的抗菌活性在加入辅助菌前后并没有明显变化。两株菌的活性物质溶液,对于温度变化及日光照射不敏感,适于pH6-8的环境,拮抗致病疫霉活性受强紫外线干扰。在马铃薯离体叶片的活体检测中表现出对致病疫霉具有良好的侵染预防活性和较微弱的侵染治疗活性。本研究对内蒙古阿拉善地区的可培养粘细菌资源及其抗致病疫霉活性进行了初步研究,为未来该地区的粘细菌资源开发利用奠定了基础。
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