有机相脂肪酶催化合成L-抗坏血酸月桂酸酯的研究

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L-抗坏血酸脂肪酸酯在食品、化妆品、医药等领域的应用非常广泛,目前在工业上采用化学方法合成。酶法合成由于其条件温和、产物安全性高而逐渐受到重视,但是由于底物在有机溶剂中的溶解度有限导致酶法合成效率低下,工业化生产前景不明朗。本课题主要对L-抗坏血酸脂肪酸酯管路式酶法合成生产工艺进行研究,寻求一种可进行工业化生产的管路式生产方法,努力提高单位时间生产产量。因此本研究对于推广更加绿色、更加安全的酶法合成脂肪酸酯方法具有重要的学术意义和应用价值。论文首先通过间歇反应合成L-抗坏血酸月桂酸酯,以丙酮作为反应介质,在50℃下利用脂肪酶(Novo435),在月桂酸与L-抗坏血酸摩尔比为4:1条件下酶催化合成,分别通过有机溶剂萃取法、硅胶柱分离法和制备液相法分离纯化得到纯品,纯度分别达到了86.5%、90.4%和95.5%。利用HPLC、MS和NMR对合成产物进行结构鉴定,确证其为L-抗坏血酸月桂酸酯。在此基础上,论文详细研究了L-抗坏血酸月桂酸酯的管路式酶法合成工艺及装置。自行搭建了一套管路式合成L-抗坏血酸月桂酸酯的填充床装置,着重研究了管路式酶催化合成的影响因素,如底物溶液流速、底物摩尔比、有无加分子筛等。在此基础上,确定了管路式合成的最佳工艺参数为:50℃下,月桂酸与L-抗坏血酸的摩尔比为6:1,流速为0.37mL/min,经过5个柱体积后反应液中产物浓度即可达到最高的24.2mmol/L并稳定,产量达到了4.62g/(L·d)。本装置还适用于L-抗坏血酸其它脂肪酸酯以及脂肪酸糖酯等的管路合成。最后,测定了L-抗坏血酸月桂酸酯的溶解度以及临界胶束浓度,并重点比较了L-抗坏血酸及其脂肪酸酯淬灭自由基和螯合金属离子能力的差异,结果表明,L-抗坏血酸月桂酸酯和L-抗坏血酸棕榈酸酯淬灭醇溶性自由基DPPH??的能力优于L-抗坏血酸,并具有显著性差异,而淬灭水溶性自由基ABTS?+和螯合铜离子能力并无显著性差异。
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