电针调节MMP-9在脑卒中溶栓治疗中保护血脑屏障的作用机制

来源 :上海中医药大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:gulangxian
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研究目的:本论文以电针在缺血性中风急性期干预大脑中动脉栓线脑缺血(MCAO)小鼠模型,研究电针是否能降低因溶栓引起的MMP-9表达,减少血脑屏障的损伤,为针灸应用提供科学依据。实验方法:C57BL/6小鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、电针组、溶栓组。正常组和假手术组不给予任何治疗,其中后三组脑缺血造模成功后2h后干预。电针组注射rt-PA后开始电针治疗(百会、风府穴);溶栓组给予静脉注射rt-PA,模型组给予静脉注射生理盐水。各组小鼠均12h后测神经功能评分,评估神经功能损伤情况;TTC染色测定正常组与模型组脑梗死区域分布。12h后各组小鼠进行核磁共振仪MRI成像观察脑梗死灶体积,以Radi Ant DICOM Viewer(64-bit)软件计算梗死灶体积,Evans blue渗漏法测定OD值观察血脑屏障通透性,干湿称重法测定脑水含量,应用Western blot测定MMP-9、LRP1蛋白表达情况。实验结果:依照Zea Longa评分,正常组、假手术组小鼠脑组织无缺血,故无神经损伤也无肢体障碍的表现,评分均为0;溶栓组、电针组、模型组的评分与假手术组相比,均有统计学差异(P<0.05)。与溶栓组比,电针组小鼠评分明显降低,P<0.05。MRI成像观察脑梗死灶体积,MCAO模型小鼠2h后溶栓组静脉注射rt-PA,电针组rt-PA+EA干预治疗;结果所示:与对照组比溶栓组有明显梗死灶,P<0.05。电针组干预后梗死灶减少,P<0.05;有统计学差异。表明电针干预能降低脑缺血损伤小鼠的脑梗死体积。通过Evans blue(EB)渗漏法测定OD值,模型组、溶栓组、电针组、大脑中均有少量的EB外渗及脑水肿。在电针干预后有效降低EB的外渗和减轻了脑水肿(电针组减少了20%);正常组与溶栓组比,P<0.05;溶栓组与电针组比,OD值降低,P<0.05;有统计学差异。采用western blot方法:正常组与MCAO模型组比,MMP-9、LRP1蛋白表达水平显著上升,P<0.05。通过电针干预治疗后,溶栓组与电针组比较,电针组MMP-9、LRP1水平表达下降,P<0.05;有统计学差异。结论:1.电针百会、风府穴可以保护溶栓治疗的脑缺血小鼠血脑屏障,改善神经功能缺损。2.电针保护血脑屏障、改善脑水肿、减少脑梗死程度的作用机制可能是通过抑制脑内MMP-9表达来实现的。
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