论文部分内容阅读
目的：以2型糖尿病小鼠为实验对象,观察小鼠肺组织病理改变以及基质金属蛋白酶-2、9的表达变化,评价氟非尼酮(AKF-PD).氯沙坦(LOS)对糖尿病肺纤维化的治疗作用,并比较两种药物的作用效果及探索可能的作用机制。方法：全雄性db/db、鼠分别随机分为六组,每组6只：5周模型组、5周AKF-PD治疗组、5周LOS治疗组、12周模型组、12周AKF-PD治疗组、12周LOS治疗组；db/m小鼠6只作为正常对照组。db/db小鼠分别于5、12周龄开始每天1次灌胃给药,直至小鼠24周龄。AKF-PD给药剂量为每日500mg/kg; LOS给药剂量为每日20mg/kg。AKF-PD溶于羧甲基纤维素钠溶液(CMCNa),模型组和正常对照组予以等量CMCNa(6.7ml/kg)每天1次灌胃,直至小鼠24周龄。实验期间每隔2-4天称量体重,实验干预前后小鼠尾静脉采血测血糖。小鼠24周龄时全部处死,收集左肺行HE染色、Masson染色观察肺组织病理改变,免疫组织化学方法检测肺组织MMP-2、9的表达。结果：1.实验干预前,糖尿病小鼠12周龄时体重、血糖与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)；实验干预后糖尿病小鼠24周龄时体重、血糖明显增加,与正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。2.HE染色结果：正常对照组小鼠肺组织结构清晰完整,肺泡分布均匀,肺间隔少量结缔组织。模型组小鼠肺组织结构紊乱,支气管壁、肺泡壁和肺间隔不同程度的增厚,部分肺泡上皮细胞显示不清,可见较多炎性细胞浸润。AKF-PD治疗组以及LOS治疗组小鼠肺组织的上述改变均有不同程度的减轻。3.Masson染色结果：正常对照组小鼠肺间质、血管周围有少量胶原纤维。模型组小鼠肺间质胶原沉积增多,高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.01)；5周AKF-PD治疗组和5周LOS治疗组小鼠分别与5周模型组比较胶原沉积下降,差异有统计学意义(P<0.05)；5周AKF-PD治疗组小鼠比较5周LOS治疗组胶原沉积减少,差异有统计学意义(P<0.05)；12周AKF-PD治疗组小鼠比较12周模型组胶原沉积下降,差异有统计学意义(P<0.01)；5周AKF-PD治疗组小鼠与12周AKF-PD治疗组比较胶原沉积下降,差异有统计学意义(P<0.05)。4.免疫组织化学结果：(1)MMP-2免疫组化：正常对照组小鼠肺组织中可见弱阳性表达。模型组小鼠肺组织阳性表达增多,与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。5周AKF-PD治疗组和5周LOS治疗组小鼠分别与5周模型组比较MMP-2表达下降,差异有统计学意义(P<0.05)；5周AKF-PD治疗组小鼠肺组织MMP-2表达低于5周LOS治疗组,差异有统计学意义(P<0.05)；12周AKF-PD治疗组小鼠与12周模型组比较MMP-2表达下降,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)MMP-9免疫组化：正常对照组小鼠肺组织中可见弱阳性表达。模型组小鼠肺组织阳性表达增多,与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。5周AKF-PD治疗组和5周LOS治疗组小鼠分别与12周模型组比较MMP-9表达下降,差异有统计学意义(P<0.01)；12周AKF-PD治疗组与12周模型组比较MMP-9表达下降,差异有统计学意义(P<0.01)。结论：1.糖尿病小鼠肺组织出现间质纤维化病变。2.糖尿病小鼠肺组织中MMP-2、9异常表达可能参与了糖尿病肺纤维化病变过程。3.氟非尼酮以及氯沙坦均可不同程度的减轻糖尿病小鼠肺纤维化,且氟非尼酮治疗效果更佳,作用机制可能与其抑制肺组织MMP-2、9的表达有关。4.氟非尼酮早期给药能更好降低肺内MMP-2的表达,并改善糖尿病肺纤维化。