PART1谷氨酰胺剥夺对乳腺癌细胞影响的生物信息学分析及关键基因的临床病理特征
　　目的：研究谷氨酰胺剥夺状态下，不同乳腺癌细胞的差异基因表达情况，鉴定其中的关键基因；借助TCGA数据库乳腺癌的样本系统分析谷氨酰胺转运相关受体在乳腺癌及其亚型中的表达；分析关键转运受体在不同TNBC亚型中的表达情况，从而探索潜在的治疗或诊断靶点。
　　方法：利用GEO2R在线分析系统鉴定GSE26370基因芯片中不同乳腺癌细胞在谷氨酰胺剥夺时的基因差异化表达情况，并通过GO和KEGG分析差异基因富集通路，通过蛋白互作网络寻找关键基因。在TCGA数据库中提取与谷氨酰胺转运相关的氨基酸转运体的表达值，与临床病理资料关联，从而分析相关的氨基酸转运体在不同的乳腺癌亚型中的表达差异。
　　结果：通过分析发现，谷氨酰胺剥夺对乳腺癌MDA-MB-231细胞产生影响较大，共有265个基因表达改变，其中上调基因富集于氨基酸代谢、转运及内质网应激通路，其中关键基因SLC1A5和SLC7A5与谷氨酰胺转运相关，而在MCF-7细胞中，未发现相关基因有明显差异化表达。通过TCGA数据库分析，发现SLC1A5和SLC7A5在乳腺癌尤其在TNBC中表达丰度较高，且SLC1A5、SLC7A5高表达提示不良预后。SLC1A5在乳腺癌各亚型中的表达存在差异，但整体高于正常组织和Luminal型乳腺癌。
　　结论：谷氨酰胺剥夺对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231影响较大，其中上调基因富集于氨基酸代谢及转运通路；SLC1A5和SLC7A5高表达提示乳腺癌不预后良；两者整体在三阴性乳腺癌亚型中表达水平较高，可作为三阴性乳腺癌治疗的潜在靶点。
　　PART2谷氨酰胺剥夺对MDA-MB-231细胞的影响及作用机制研究
　　目的：探索谷氨酰胺剥夺对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖及迁移能力的影响。
　　方法：通过谷氨酰胺剥夺实验，观察MDA-MB-231细胞增殖及迁移能力的改变，并分析谷氨酰胺转运体SLC1A5在其中的调节机制。
　　结果：SLC1A5在乳腺癌亚型中的表达结果不一，其中在高侵袭性细胞株(MDA-MB-231)表达高于低侵袭性细胞株(MCF-7)。划痕实验提示，谷氨酰胺剥夺6h的MDA-MB-231细胞迁移能力增强；通过WesternBlot及RT-qPCR检测，发现跟正常Gln(4 mM)培养组相比，0mMGln组SLC1A5在蛋白及mRNA水平均升高。敲低SLC1A5后，0MmGln培养组的MDA-MB-231侵袭力下降，提示谷氨酰胺剥夺引起MDA-MB-231细胞增殖及迁移能力增强通过SLC1A5上调实现；生物信息学预测，miR-137为其上游调节因子，RT-qPCR检测发现0mMGln组miR-137表达下降，并且过表达miR-137后，SLC1A5表达水平下降。
　　结论：谷氨酰胺剥夺增强了MDA-MB-231细胞的增殖及迁移能力；其通过SLC1A5的表达升高发挥作用。
　　PART3基于谷氨酰胺成瘾的Gln-PEG5000-b-PAE10000@DOX纳米胶束构建及在三阴性乳腺癌中的应用
　　目的：构建一种经谷氨酰胺修饰的、pH敏感的可生物降解的纳米胶束，作为载药系统主动靶向治疗肿瘤。
　　方法：通过将谷氨酰胺共轭甲基醚聚乙二醇(PEG5000-b-PAE10000)结合到PEG-聚氨基酯(PAE)纳米胶束中，再封装DOX到纳米胶束中，合成了具有活性的肿瘤靶向和肿瘤pH响应性纳米载体。
　　结果：这种在水溶液中形成纳米自组装胶束的共聚物，能够有效负载阿霉素(DOX)。在体外药物释放研究中，这些DOX负载聚合物胶束表现出明显的pH依赖性胶束化行为，在酸性环境(pH 6.0)下胶束中DOX快速释放，但在生理条件(pH 7.4)下释放非常缓慢。构建的纳米靶向载体在室温环境及体内环境中稳定；由于具有谷氨酰胺配基，因此在0mMGln培养组MDA-MB-231细胞摄取量较4mMGln培养组增加。该修饰有谷氨酰胺的纳米胶束对正常血管内皮细胞的毒性无增加。
　　结论：该载药纳米胶束具有良好的体外稳定性，能被MDA-MB-231细胞定向吸收，在酸性环境中，药物释放效率高，且该材料对正常细胞的毒性反应小。