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第一部分WASp缺陷致致炎症性肠病的肠道菌群和肠道内胸腺来源调节性T细胞的研究目的:明确WAS患儿及WASp缺陷小鼠模型肠道菌群组成,探索其与正常对照肠道菌群是否不同。探索WASp缺陷小鼠发生炎症时肠道tTreg细胞相对比例变化。方法:采集WAS患儿和6月龄以上WASp缺陷小鼠大便标本,提取大便菌群DNA,以16s rRNA基因序列为基础,针对V4、V5区进行肠道菌群序列扩增,筛选优势序列,并行肠道菌群多样性及差异统计学分析。提取WASp缺陷小鼠各层肠道淋巴结细胞,流式细胞术检测肠道内tTreg细胞。结果:WAS患儿的肠道菌群与正常儿童比较出现多样性变化,WASp缺陷时,除了与正常宿主共同拥有相同的OTU之外,还独立拥有属于自己的OTU。WAS患儿肠道菌群中变形菌门占优势,而拟杆菌门水平减低。而WKO小鼠厚壁菌门水平下降。WKO小鼠模型中结肠的t Treg相对比例比野生型多,而Foxp3的相对比例却是下降的,在小肠中却未观察到此现象,表明tTreg主要受结肠微生物菌群影响。结论:本研究发现肠道菌群在炎症情况下,或者宿主遗传背景存在缺陷导致的炎症性肠病的情况下,肠道菌群确实发生改变,而且变化集中在常见的门类水平。结肠tTreg表达的相对比例可能受肠道内菌群影响。第二部分一例可疑Alstrom综合征患者病例分析目的:通过对一例可疑Alstrom综合征患儿进行临床表现分析,以及外周血淋巴细胞分析,探索Alstrom综合征患者体内可能的免疫调节变化。方法:采集患儿病史,分析其病情变化。采集患儿外周血,提取DNA,进行一代测序验证分析。提取外周血淋巴细胞,流式检测分析各淋巴细胞亚群变化。结果:该患儿生后就存在反复感染,虽有全身多器官病变,但是不表现Alstrom综合征经典临床表型。基因测序发现,该患儿确实存在ALMS1突变,且有两个突变位点。本研究监测该患儿淋巴细胞免疫表型发现该患儿B细胞数量下降,这可能是该患儿反复感染的原因。结论:Alstrom综合征一般表现为多器官代谢障碍,本例患儿出现免疫系统异常,因此,ALMS1的突变类型及免疫调节机制有待于进一步探索。