交联琼脂糖的制备及作为胆红素吸附剂的研究

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琼脂糖凝胶是生物分离领域应用最为广泛的一种多糖类介质,具有亲水性、多孔性、生物相容性好和易于改性等特点。目前琼脂糖凝胶均为进口产品,价格昂贵,阻碍了其作为一次性血液净化基质在临床上的应用。针对这一现状,本论文在前人工作基础上,系统研究了交联琼脂糖凝胶的制备方法,并进一步以该凝胶为基质,聚乙烯亚胺(PEI)为连接臂,以羟丙基β-环糊精为功能基团制备了胆红素吸附剂,评价了其胆红素吸附性能。琼脂糖凝胶的制备采用了目前应用最广的反相悬浮搅拌法,主要从油相组成、乳化剂浓度、乳化剂亲水亲油平衡值(HLB)、搅拌桨转速、反应容器等方面考察了琼脂糖微球的最优制备方法,同时研究了琼脂糖微球的交联与筛分方法,以期得到具有一定物化稳定性和粒径分布范围的微球材料。研究发现:当搅搅拌转速为800rpm,油相组成的液体石蜡和石油醚体积比为10:1的混合液,油相中含乳化剂浓度4%,乳化剂的HLB值为7.5时,制得粒径在100μm附近的琼脂糖微球最多;当坏氧氯丙烷浓度为0.1mL/mL gel,NaOH终浓度为1.0mol/L时,交联所得的交联琼脂糖微球的性能可以达到国内外同类产品的标准;利用自制的筛分装置实现了交联琼脂糖微球的筛分,最终得到粒径分布在35-165μm范围内的琼脂糖微球,收率达到70%。以交联琼脂糖为基质的胆红素吸附剂的合成,采用了环氧氯丙烷活化琼脂糖微球,之后连接PEI分子作为连接臂,再偶联上醛基化的羟丙基p-环糊精的方法,制备β-CD胆红素吸附剂,考察其胆红素吸附动力学和等温吸附曲线,并研究了离子强度、温度、白蛋白含量和动态过程对吸附容量的影响。结果表明:β-CD-Agarose吸附剂对游离胆红素的饱和吸附量为2.93mg/mLgel,1h可达到吸附平衡;β-CD-Agarose吸附剂对胆红素的吸附符合Freundlich吸附,吸附常数K值为11.05,n值为1.026;β-CD-Agarose吸附剂对游离胆红素的吸附量随离子强度的增大而降低,随温度的升高而增大,随白蛋白含量的增加而降低;动态上柱结果显示吸附容量有所下降但不影响实际应用。
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