黑果茶藨果渣中花色苷的分离纯化工艺研究

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日常生活中大部分植物的花和叶都会呈现各种各样鲜艳的颜色,这其实正是天然色素花色苷存在的原因,广泛分布于植物的根茎叶等大部分组织中,是一类具有苯并吡喃结构的黄酮类物质,由六种花色素和多种单糖或二糖组成多种结构形式;而且花色苷可以对人体起到抗氧化、清除自由基以及抗癌的作用,是人类生活中不可或缺的保健品,同时黑果茶藨中含有大量的花色苷。近些年由于研究工作不断深入,关于花色苷的研究成果得到来自医药界、日用化工等领域认可。尽管如此,但是在花色苷开发过程中受设备,技术水平及原料来源和储备方式不完善以及花色苷自身的不稳定等影响,在对花色苷开发研究中未取得突破性进展。因此在对黑果茶藨的提取分离纯化上尚有较大的提升空间。本课题以黑果茶藨果渣中花色苷为研究对象,主要考察运用匀浆-微波联用的方法提取黑果茶藨中花色苷,并对不同种类的花色苷进行分离。采用匀浆-微波联用的方法从黑果茶藨中提取花色苷,并且通过单因素正交实验确定乙醇为提取溶剂。最合适的提取参数由RSM响应面分析并且确定:微波功率550W,微波时间16 min,乙醇浓度60%,匀浆时间3 min,液料比28.3 mL/g,抗氧化剂0.3%的TBHQ,提取液pH 2.5,实际从黑果茶藨中提取花色苷473.7±9.5μg/g。黑果茶藨中含有六种花色苷,分别为矢车菊素-3-葡萄糖苷、矢车菊素-3-芸香糖苷、飞燕草素-3-葡萄糖苷、飞燕草素-3-芸香糖苷、矢车菊素-3-(6-香豆酰基)-葡萄糖苷和矮牵牛素-3-(6-香豆酰基)-葡萄糖苷。黑果茶藨中含有大部分的前四种花色苷成分,并利用高速逆流色谱法进行分离,采用甲基叔丁基醚:正丁醇:乙腈:水:三氟乙酸(2:2:1:5:0.001)为溶剂系统以及转速1000 r/min、流速1.5 mL/min、检测波长530nm、温度30℃等操作参数,可以成功的分离出四种主要的花色苷:矢车菊素-3-葡萄糖苷、矢车菊素-3-芸香糖苷、飞燕草素-3-葡萄糖苷、飞燕草素-3-芸香糖苷。
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