苹果霉心病是普遍发生的苹果果实病害。霉心病可造成采收前落果、心室霉变腐烂和贮藏期烂果等,严重影响苹果的产量与质量。明确病害侵染规律是制定有效防治策略的基础。苹果霉心病的发生与果实结构关系密切,心室开放品种的苹果霉心病发生更为严重。粉红聚端孢和链格孢是引起我国苹果霉心病主要病原菌。前期本实验室明确了心室半开放品种富士的侵染特性,本研究拟借助粉红聚端孢荧光标记菌株开展心室开放品种红星的侵染通路研究,同时构建链格孢荧光标记菌株进行花期侵染特性观察;基于侵染特征,制定针对性防治方案并开展田间试验评价防治效果,以期为苹果霉心病的防治提供依据。主要取得以下研究结果:1.利用带荧光标记的粉红聚端孢Trichothecium roseum TR45在花期接种红星花器组织,解剖观察分析其侵染通路,结果显示:粉红聚端孢可以侵染苹果花瓣、雄蕊、雌蕊等花器;落花后10-15 d,大部分花器残体被萼片包拢到萼筒内;粉红聚端孢从离生花柱间孔口侵入合生花柱,沿多细胞毛状体从花柱缝扩展至花柱基部;花后约30 d,萼心间和心室壁组织逐渐开裂,形成一条贯通心室与花柱的通道—萼窦,萼窦随果实膨大逐渐扩大;花后约60 d,菌丝沿着开放的萼窦扩展进入心室腔,从心皮裂缝侵入果肉组织引起腐烂。这些结果表明,在幼果期花柱缝为侵染的主要通道,该侵染特性与富士品种一样,但红星品种萼窦开放明显早于富士,菌丝可以更早进入心室,这可能是红星品种发病率更高的一个原因。2.链格孢Alternaria alternata是苹果霉心病主要病原菌之一,为明确链格孢侵入苹果心室的侵染特征,本论文开展了链格孢荧光菌株构建及花期侵染特性研究。鉴于链格孢菌细胞壁较厚、色素沉积较大,可能影响标记菌株的荧光观察,本研究将GFP基因与几丁质结合蛋白(CBP)基因连接构建质粒。遗传转化获得了表现较强荧光的链格孢CBP-GFP标记菌株ZQ65,其分生孢子、菌丝、菌落形态、生长速度及致病性与野生型菌株无显著差异。将ZQ65孢子悬浮液在花期接种苹果花器组织,48 h后花药、花丝、花柱、花瓣等组织发生病变。这些结果显示,链格孢可以在苹果花器组织上萌发并侵染引起发病,荧光菌株ZQ65可用于研究链格孢侵染苹果组织过程。3.对苹果心室螨类的习性进行了初步研究,发现心室伴生的螨虫可取食链格孢和粉红聚端孢菌丝和孢子,并在PDA培养基菌落上繁殖。初步鉴定螨虫为具有食真菌特性的乱跗线螨Tarsonemuz confocus Ewing和腐食酪螨Tyrophagus putrescentiae Schrank。田间实验显示,螨类可以携带粉红聚端孢孢子和菌丝体;统计显示,苹果霉心病的发生和心室出现螨虫有显著相关性(P<0.05)。这些结果表明,心室螨虫可携带苹果霉心病病菌,作为传播介体有可能在苹果霉心病的发生中发挥一定作用。4.2018和2019年在陕西白水、甘肃天水、河南三门峡进行了苹果霉心病防治试验。试验共设计了5个防治处理:花后和套袋前喷施2次多抗霉素+杀螨剂以及套袋后-成熟期3-5次杀螨剂;花后-套袋前喷4次多抗霉素;花后-套袋前喷3次多抗霉素+杀螨剂;花后-套袋前喷2次多抗霉素+释放3次捕食螨;落花期-套袋前喷4次生防菌剂。结果显示:与对照相比(花后与套袋前喷施2次多抗霉素),这些处理的防效均低于40%,对心室伴生的螨虫也没有明显防治效果。