IL-17F/IL-17RC对大鼠肺微血管内皮细胞小窝蛋白1表达的影响

来源 :安徽医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:doudou2008
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目的探讨白细胞介素(IL)-17F及IL-17受体C(IL-17RC)对大鼠肺微血管内皮细胞(PMVECs)表达的小窝蛋白1(Cav-1)影响。方法将体外培养的大鼠PMVECs分为时效组以及IL-17RC信号通路干预组;根据时效组结果:即IL-17F诱导大鼠PMVECs的Cav-1及其磷酸化表达峰值的时间,制定IL-17RC信号通路干预组IL-17F与大鼠PMVECs孵育时间:(1)时效组:100ng/ml的IL-17F刺激0 h、0.5 h、1.5 h、3 h、6 h、12 h、24 h后Western印迹法检测Cav-1表达以及0 min、10 min、30 min、60 min、90 min、120 min后检测Cav-1及其磷酸化(p-Cav-1)表达;(2)IL-17RC信号通路干预组:si RNA病毒与大鼠PMVECs预孵育3 d后分成2组,第1组给予100 ng/ml的IL-17F刺激60 min后检测p-Cav-1表达,第2组给予100 ng/ml的IL-17F刺激24 h后检测Cav-1表达,各组分别设对照组、non-si RNA组、IL-17RC-si RNA组、IL-17F组以及non-si RNA+IL-17F组作为参照。结果IL-17F时间依赖性增加大鼠PMVECs表达Cav-1,0 h、0.5 h、1.5 h、3 h、6 h、12 h、24 h相对表达量分别为(1.139±0.134)、(1.276±0.166)、(1.604±0.080)、(2.115±0.231)、(2.763±0.226)、(3.309±0.493)、(3.963±0.169),1.5 h开始显著高于0 h,24 h达峰值且显著高于0 h、0.5 h、1.5 h、3 h、6 h、12 h(均P<0.05);IL-17F时间依赖性增加p-Cav-1表达,0 min、10 min、30 min、60 min、90 min、120 min相对表达量分别为(0.540±0.085)、(0.880±0.084)、(1.437±0.297)、(1.491±0.212)、(1.017±0.210)、(0.882±0.074),10 min开始显著高于0 min,60 min达峰值且显著高于0 min、10 min、30 min、90 min、120 min(均P<0.05),然后逐渐下降,120 min仍高于0 min。IL-17RC-si RNA可显著抑制IL-17F诱导的Cav-1和p-Cav-1表达(2.126±0.318比3.897±0.424和1.014±0.136比1.431±0.298,均P<0.05)。结论IL-17F时间依赖性增加大鼠PMVECs的Cav-1及p-Cav-1表达;沉默大鼠PMVECs的IL-17RC表达显著抑制IL-17F诱导的Cav-1及p-Cav-1表达。
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