脂肽生物表面活性剂的菌株筛选、结构分析及应用研究

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该课题研究了从大庆油田220个油水样中,经富集培养、血平板筛选、油平板分离、摇瓶培养和表面张力测定等步骤筛选出一株能产生生物表面活性剂的细菌SD59,对SD59菌株进行了形态、生理生化和16S rDNA序列分析的系统鉴定,根据《Bergeys Manual of Determinative Bacteriology》进行生理生化鉴定并根据16S rRNA序列在National Center Biotechnology Information使用BLASTN程序进行比对的结果以及用DNAMAN软件进行进化树分析结果.鉴定SD59菌株是地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis).表面活性剂经分离、纯化亦经过薄层层析(TLC)和红外光谱分析(FT-IR)等结构分析,被鉴定为脂肽生物表面活性剂,可以把发酵液表面张力降到31mN/m,而且具有良好的乳化和增溶效果.通过正交实验和单因素实验等方法研究了各种营养物质和环境因素对菌株SD59发酵生产脂肽表面活性剂的影响.研究并确定了优化的培养基组成为(g/L):淀粉25.0,葡萄糖5.0,硫酸铵5.0,硝酸钠1.0,硫酸镁0.3,氯化钙0.08,酵母粉0.5,磷酸二氢钾2.0,磷酸氢二钠8.0,初始pH7.2.最佳摇瓶培养条件为500ml三角瓶的装液量为200ml,接种量5﹪,培养温度36~38℃,转速160r/min.在此条件下,表面活性剂的产量最高可达到1.2g/L以上.利用10L发酵罐进行放大实验,进一步探讨了脂肽生物表面活性剂的发酵条件.SD59菌株作用于原油可以使原油组分均发生改变,有利于原油的乳化、增溶、降蜡和降粘作用.
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