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目的
通过健康普通级新西兰兔建立蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)动物模型,将分离的异体兔外周血单核巨噬细胞移植入模型兔蛛网膜下腔,提取脑脊液标本进行转录组测序分析,筛选出差异表达基因并分析差异表达基因生物学功能,以研究蛛网膜下腔出血状况下巨噬细胞移植对极化状态和病情的影响,探讨细胞治疗对蛛网膜下腔出血的治疗作用和临床应用的可能性。
方法
1.取健康普通级新西兰兔,经兔枕大池(小脑延髓池)二次注入自体动脉血建立SAH模型,观察兔子饮食状况、一般表现和活动等情况。
2.将新西兰兔随机分组,实验组(分离异体兔外周血单核巨噬细胞植入SAH模型兔蛛网膜下腔)、对照组(生理盐水注入SAH模型兔蛛网膜下腔),分别于1天、3天、7天、14天提取兔脑脊液进行转录组测序并进行数据分析。
结果
1.造模中注入自体血后,兔精神状态渐差,显躁动,部份有抽搐;注血后取得脑脊液呈血性,第14天时两组脑脊液均呈清亮。
2.全部样本进行质控,Q30均≥90%,满足实验需求;转录本覆盖均一性分布为正确的分布状态,不存在5’/3偏差。
3.1天、3天、7天内,随着时间变化,差异基因也明显增多,且主要与免疫反应、细胞代谢、生物合成、细胞周期、基因表达等功能有关。
4.实验组M1型极化因子CD163、TNF-ɑ、IL-6、IL-1β均呈上调势,M2型极化因子TGFB3在第7天上调。
结论
发生SAH后早期(1-3天)巨噬细胞以M1型极化占优,7天开始出现M2型极化因子上调。
通过健康普通级新西兰兔建立蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)动物模型,将分离的异体兔外周血单核巨噬细胞移植入模型兔蛛网膜下腔,提取脑脊液标本进行转录组测序分析,筛选出差异表达基因并分析差异表达基因生物学功能,以研究蛛网膜下腔出血状况下巨噬细胞移植对极化状态和病情的影响,探讨细胞治疗对蛛网膜下腔出血的治疗作用和临床应用的可能性。
方法
1.取健康普通级新西兰兔,经兔枕大池(小脑延髓池)二次注入自体动脉血建立SAH模型,观察兔子饮食状况、一般表现和活动等情况。
2.将新西兰兔随机分组,实验组(分离异体兔外周血单核巨噬细胞植入SAH模型兔蛛网膜下腔)、对照组(生理盐水注入SAH模型兔蛛网膜下腔),分别于1天、3天、7天、14天提取兔脑脊液进行转录组测序并进行数据分析。
结果
1.造模中注入自体血后,兔精神状态渐差,显躁动,部份有抽搐;注血后取得脑脊液呈血性,第14天时两组脑脊液均呈清亮。
2.全部样本进行质控,Q30均≥90%,满足实验需求;转录本覆盖均一性分布为正确的分布状态,不存在5’/3偏差。
3.1天、3天、7天内,随着时间变化,差异基因也明显增多,且主要与免疫反应、细胞代谢、生物合成、细胞周期、基因表达等功能有关。
4.实验组M1型极化因子CD163、TNF-ɑ、IL-6、IL-1β均呈上调势,M2型极化因子TGFB3在第7天上调。
结论
发生SAH后早期(1-3天)巨噬细胞以M1型极化占优,7天开始出现M2型极化因子上调。