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研究背景:膀胱癌是泌尿系统最常见的恶性肿瘤之一,严重威胁人类的健康。探明膀胱癌的发生发展机制,寻找新的治疗靶点是改善膀胱癌患者预后的关键。microRNA是由大约为22个核糖核苷酸组成的非编码单链RNA分子。大量的报道显示出,microRNA在诸多肿瘤中都呈现为异常表达,并影响细胞内癌症相关基因的表达与调控,从而影响肿瘤的发生发展过程。mirco RNA已经成为新型的肿瘤分子标志物及治疗靶点。Rb基因是常见的抑癌基因。Rb基因的突变或异常表达与癌症的进展密切相关。我们通过查阅相关的文献和前期的筛选,假设miR-6838可能通过抑制Rb通路诱发膀胱癌,但上述科学假设仍有待进一步的研究来证实。研究目的:本课题拟阐明miR-6838调控膀胱癌细胞增殖与侵袭能力的分子机制,探讨miR-6838介导膀胱癌发生发展的可能机制,为后续靶向miR-6838治疗膀胱癌提供理论依据。研究对象和方法:本研究中主要包括90例膀胱肿瘤临床样本(包括30例膀胱原位癌,30例T1/T2期膀胱癌和30例T3/T4期膀胱癌)的癌症手术中收集膀胱癌组织标本、T24膀胱肿瘤细胞系及HEK293T细胞。首先在转录及翻译水平,利用荧光定量PCR及Western Blot检测膀胱肿瘤样本中mir-6838及Rb蛋白的表达情况。而后在T24膀胱肿瘤细胞内转染mir-6838,通过Transwell细胞迁徙实验及PI/Annexin V染色,分析其对肿瘤侵袭性及细胞凋亡的影响。最后利用Rb蛋白3`非翻译末端重组荧光素酶报告基因,验证mir-6838直接参与Rb蛋白的表达调控,并诱发膀胱肿瘤。结果:1)膀胱癌组织及膀胱癌细胞系中mi R-6838表达明显上调,Rb基因表达明显下调。2)miR-6838以剂量依赖性方式显著促进T24细胞的增殖和侵袭,抑制细胞凋亡。同时在T24细胞内转染miR-6838抑制物后,T24细胞的增殖和侵袭明显受到抑制,细胞凋亡显著增加。3)miR-6838作用于Rb基因3`非翻译末端,并抑制细胞内Rb基因的表达,上调细胞周期蛋白(CyclinD1,CyclinB)和侵袭相关蛋白(E-钙粘蛋白和波形蛋白)表达。miR-6838可能通过对RB的调控作用调节了膀胱癌细胞的增殖、凋亡和侵袭作用。结论:miR-6838在膀胱癌组织和癌细胞系明显上调,并通过下调Rb蛋白的表达增加膀胱癌细胞的侵袭力。我们首次报道了miR-6838在膀胱癌中的关键作用以及miR-6838对Rb基因的靶向调控作用,提示其可作为膀胱癌的潜在治疗靶点。