望春玉兰花瓣类黄酮组成及转录组分析

来源 :浙江农林大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:xiaoyao984
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望春玉兰(Magnolia biondii)是一种观花落叶乔木,广泛应用于城市绿化中。望春玉兰常见的花色为粉白色,而经调查后发现了一种紫花望春玉兰(M.biondii var.purpurascens),这种在自然状态下形成的花色突变体为研究花色变异分子机制的优良植物材料。为了研究紫花望春玉兰形成的差异机制,本研究以白花望春玉兰、紫花望春玉兰作为实验材料,利用高效液相色谱-质谱联用技术(HPLC-DAD/ESI-MS~2)对望春玉兰花瓣中的类黄酮组成进行了分析,同时利用测序技术(RNA-Seq)获得了望春玉兰花瓣转录组,利用实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)筛选出了合适的内参基因,并对类黄酮合成相关基因的表达模式进行了分析。本研究结果可为进一步探讨望春玉兰花瓣的呈色机制、挖掘类黄酮合成相关基因的功能奠定基础,为望春玉兰花色改良育种提供理论参考依据。主要结果如下:1.从望春玉兰花瓣中检测得到4种花青素,分别为矢车菊素和芍药花素的衍生物,以及10种黄酮醇,分别为异鼠李素、槲皮素和山奈酚的衍生物,其中芍药花素为望春玉兰花瓣主要的呈色物质。紫花望春玉兰花瓣中的类黄酮含量高于白花望春玉兰,其中花青素含量的增加导致了花色的加深。在花开放过程中,望春玉兰花瓣中类黄酮的积累主要在花蕾期完成。2.通过转录组测序共获得35692个基因,对比各阶段基因的表达量,获得3922个差异基因。根据qRT-PCR结果,筛选得到了可能与类黄酮合成途径相关的13个结构基因以及3个转录因子。3.通过对10个候选内参基因的表达稳定性进行评价,得到在两种花色不同开花时期的望春玉兰花瓣中,最佳的内参基因为MbTEF、MbCYP和MbGAPDH。4.在13个类黄酮合成途径结构基因中,MbFLS、MbANS的表达模式与黄酮醇、花青素含量积累规律最为吻合。多数结构基因在紫花望春玉兰中的表达量高于白花望春玉兰,且在花开放过程中基因表达量变化趋势与类黄酮含量变化趋势保持一致。推测类黄酮合成途径中相关结构基因表达量的增加是导致紫花望春玉兰花瓣中花青素含量积累的主要原因。
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