【摘 要】
:
乙型脑炎病毒(JEV)是流行性乙型脑炎的病原体。本研究旨在进行JEV关键毒力位点分析、鉴定E-I176R(E蛋白第176位氨基酸由异亮氨酸突变为精氨酸)突变位点能否影响其神经毒力。
论文部分内容阅读
乙型脑炎病毒(JEV)是流行性乙型脑炎的病原体。本研究旨在进行JEV关键毒力位点分析、鉴定E-I176R(E蛋白第176位氨基酸由异亮氨酸突变为精氨酸)突变位点能否影响其神经毒力。首先,分析预测了JEV神经毒力相关突变位点6个。在进行了JEV SCYA201201-1与SCYA201201-0901毒株的全基因序列测定的基础上,进行了其神经毒力的鉴定,分析获得了JEV神经毒力相关氨基酸突变位点6个:E蛋白A72T、I176R、S251Y、E273K,NS2B蛋白V44A和NS4A蛋白G168E。其次,成功拯救了JEV E-I176R单点突变病毒。利用定点突变和反向遗传操作方法构建并包装了JEV E-I176R单点突变病毒,利用蚀斑形成试验、PCR、序列测定等方法对包装的病毒进行了鉴定,在BHK-21细胞进行了体外生长特性的研究,发现目标点突变对JEV的蚀斑形成特性与生长曲线没有显著影响。最后,阐明了乙型脑炎病毒E-I176R突变位点能够显著降低其神经毒力。将84只小鼠平均分为14组进行神经毒力实验,每个病毒滴度重复3次进行验证,发现200与2000PFU的未突变病毒引起小鼠的死亡率分别为55.56%与88.89%,而200与2000PFU的E-I176R单点突变病毒引起小鼠的死亡率分别为11.11%与50%。荧光定量检测结果显示,未突变病毒在鼠脑内含量在攻毒后3、5、7天逐渐升高,而E-I176R单点突变病毒在3、5、7天保持稳定。本研究分析出了6个JEV神经毒力相关氨基酸突变位点,证实了E-176为影响乙脑病毒毒力的关键位点,E-I176R单点突变能够能显著降低其神经毒力。本研究为乙脑病毒致弱机制的深入研究奠定了基础。
其他文献
在地热资源热储层的开采过程中,高温环境下水泥基固井材料的性能是确保固井质量的关键,直接关系到热储层开采的顺利进行。针对常规水泥基固井材料在热储层开采固井过程中流动性控制、高温下的强度衰减、脆性破坏等关键技术问题,对热储层开采水泥基固井材料体系进行系统性的研究具有重要的工程意义与科学价值。采取理论分析、试验研究与微观分析相结合的方法,较系统的开展了热储层开采纳米SiO_2-玄武岩纤维复合水泥基固井材
本文研究了美军杀伤链的关键环节、DCGS的组成与信息流程,分析DCGS在空中作战杀伤链中的作用。通过时敏目标打击、弹道导弹防御等几种典型的杀伤链打击场景,分析DCGS在时敏目
自从富勒烯被发现以来,研究人员对于富勒烯领域进行了广泛而深入的探索,研究了富勒烯的诸多性质,也陆续发现了很多种类的富勒烯。违背五元环规则的新型non-IPR富勒烯则越来越受研究人员的重视,它们有的具有某些优异的性质,可以在催化、太阳能电池等领域有着较大的应用前景;有的具有某些特别的结构,可以帮助我们探索富勒烯的形成机理。但是这些新型non-IPR富勒烯的含量一般较低而且较为活泼,在合成、分离等方面
红花尔基白钨矿矿床是近年来大兴安岭地区发现的热液石英脉型白钨矿矿床,白钨矿主要赋存于花岗岩体内部的石英脉中。前人对其成矿作用方面已经做了较多研究,基本厘定了矿床的成矿时代与花岗岩地球化学等特征,但在蚀变作用方面的研究相对较为缺乏。本文主要通过岩相学研究、电子探针分析、流体包裹体研究等对其蚀变及流体作用进行深入研究,同时对似斑状二长花岗岩年代学及地球化学方面进行研究分析。通过蚀变作用分布的研究可知斜
艾里光束具有无衍射、自愈以及其独有的自弯曲性质,近年来在光学界掀起了研究热潮。具有横向加速度的艾里光束被广泛应用于微粒清扫、微粒捕获、等离子体通道、光子弹以及医
在刀具切削过程中,工件塑性变形和刀-屑间的剧烈摩擦会产生大量切削热,导致刀具快速磨损,并使得工件材料软化出现“粘刀”现象,降低刀具寿命和工件加工质量。因此,改善刀-屑间的摩擦状态,减少切削热成为切削加工研究的重要内容。目前实际工程中普遍使用切削液对切削区域进行冷却和润滑,但由于切削区域高温高压的环境以及内摩擦区域刀-屑紧密接触,同时传统冷却方式中切削液流速低、压力小,难以进入刀-屑关键摩擦区域,使
目的:我国食管癌患病率和死亡率排在全球第五位,严重影响人类健康。放疗是其重要治疗方法,但随着放疗设备及放疗技术的不断提高与完善放疗疗效并未显著提升,因此认为食管癌细
青藏高原的隆升和剥露被认为是新生代以来众多地质事件的诱发因素,形成了青藏高原独特的地形地貌特征。前人研究主要集中在高原东部及中部地区,而对西部地区剥露历史的研究目前报道较少。高原西部地区具有独特的地质与地貌特征,发育数条规模较大的断层,同时存在外部与内部水系。针对上述问题,我们对狮泉河—革吉地区侵入岩开展了系统的地质年代学和低温热年代学的研究,并使用HeFTy与QTQt软件对低温热年代学数据开展了
背景和目的:脊髓损伤(Spinal cord injury,SCI)是神经创伤研究中的主要挑战之一。脊髓损伤后发生复杂的病理生理过程,导致轴突断裂,脱髓鞘改变,造成神经功能丧失,这些变化会
近年来,激光冲击微成形技术已经成为了微成形领域的一个研究热点。本文研究了一种激光冲击液体微成形的新工艺,以激光作为冲击源、液体作为传力介质,适用于成形具有大面积阵列微特征的金属箔板。论文通过数值模拟探索了工艺可行性与成形机理,并在数值模拟的基础上进行了工艺参数优化,为下一步的实验研究提供指导,主要研究工作与成果如下:首先,介绍了激光冲击液体微成形工艺的原理,描述了激光与物质相互作用机理及材料在高应