论文部分内容阅读
目的：检测慢性乙型肝炎(简称慢乙肝)、肝硬化、重型肝炎患者以及健康对照者外周血单个核细胞(Peripheral Blood Mononuclear Cell，PBMC)中TOLL样受体4(Toll-like receptor 4，TLR4)蛋白及mRNA的表达，探讨其在慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染患者中的意义及其作用机制。方法：流式细胞术及逆转录聚合酶链免疫反应(RT-PCR)方法分别检测37例慢性乙肝患者，28例肝硬化患者，31例慢性重型肝炎患者及27例健康对照者PBMC TLR4蛋白及mRNA的表达；同时检测患者肝功能情况、凝血酶原活动度(PTA)、血常规及实时定量PCR方法检测血清HBVDNA滴度。结果：(1)各实验组外周血单个核细胞表面TLR4蛋白的表达情况是：单核细胞表达阳性率＞淋巴细胞＞中性粒细胞(P＜0.05)。(2)重型肝炎组、肝硬化组以及慢乙肝组TLR4蛋白及mRNA的表达均明显高于正常对照组(P＜0.05)。(3) TLR4的表达随疾病发展逐渐升高，即慢乙肝组＜肝硬化组＜重型肝炎组。慢乙肝组、肝硬化组、重型肝炎组外周血单个核细胞TLR4 mRNA的表达量分别为0.1557±0.0333，0.4829±0.0806，0.7270±0.0746，各组之间的表达量差异有显著性(P＜0.01)。(4) TLR4蛋白的表达水平与TLR4mRNA的表达量呈显著正相关(r=0.897，P＜0.01)，且与患者的ALT、AST、TBIL及中性粒百分比之间呈正相关性(r值分别为0.475、0.558、0.924、0.443，P＜0.05)。(5) TLR4蛋白的表达水平与患者白蛋白、凝血酶原活动度呈负相关(r值分别为-0.927、-0.902，P＜0.05)。(6) TLR4蛋白的表达水平与患者的HBVDNA之间无明显相关(r值为-0.272)。结论：(1) TLR4在内毒素识别或发挥免疫效应的靶细胞是外周血单核细胞及淋巴细胞，而非中性粒细胞。(2)慢性HBV感染患者外周血TLR4蛋白及mRNA表达的增高随患者疾病进展逐渐升高，且重型肝炎组的表达水平明显高于其他各组。(3)慢性HBV感染患者外周血TLR4蛋白及mRNA表达的增高与肝脏炎症程度密切相关。(4)慢性HBV感染患者中TLR4的高表达不是直接通过对HBV-DNA识别而激发免疫损伤。