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本研究试图从分子生物学角度来揭示目前猪瘟仍频繁发生的原因，为广泛开展CSFV分子流行病学的研究提供基础资料，为CSF的防制提供科学依据和理论支持，为猪瘟诊断提供稳定的标准诊断抗原及诊断方法。本论文由2部分构成： 1．应用RT-PCR扩增了一株国内地方流行的CSF野毒全长ORF基因，对其进行了核苷酸序列测定及氨基酸序列推导，同时将其与C株、Alfort株、HCLV株和SM株进行了同源性比较及遗传进化分析，结果表明，地方流行野毒株与C株，Alfort株，HCLV株，SM株核苷酸序列同源性分别为95.8％、97.9％、95.7％和99.7％；氨基酸同源性分别为97.4％、98.7％、97.5％和99.7％。本次实验所测得序列与石门标准强毒株核苷酸同源性很高，与我国使用的疫苗株(HCLV)核苷酸同源性和C株则同源性大大降低，说明某些猪瘟病毒流行株的变异已经开始向远离疫苗株的方向变异，推测现行的猪瘟疫苗对某些地方流行株的保护作用可能已经降低。 2．应用RT-PCR技术对疫苗株(HCLV)、经典强毒株石门毒株(SM)EO基因分段进行扩增，得到约198bp、238bp、343bp的基因片段。将这3个基因分别克隆到原核表达载体pGEX-6p-1中，经酶切、PCR扩增和测序分析确证其正确插入到表达载体中，且阅读框正确，从而构建成重组表达载体。重组质粒转化至宿主菌BL21(DE3)中，用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)进行诱导表达，用SDS-PAGE电泳，Western-blotting分析表达的蛋白。结果表明，EO基因几个片段均可以在大肠杆菌中表达，表达的蛋白以包涵体形式存在，表达产物的分子量约为36kDa、38kDa、42kDa(载体GST分子质量为29kDa、融合表达)，与理论推测的蛋白分子量一致；在Western-blotting实验时，表达产物经SDS-PAGE电泳后，转移至NC膜上，在加一抗时选用不同的血清(SM毒攻毒后采集的猪阳性血清和HCLV株免疫后采集的血清)，进行交叉免疫学反应。表达产物pGEX-X、pGEX-Y和pGEX-Z以SM株为模板；pGEX-E、pGEX-F和pGEX-G以HCLV株为模板。结果表明SM阳性血清和HCLV阳性血清对pGEX-Y和pGEX-F片段(317—398AA)表达蛋白都可以发生反应。SM阳性血清与pGEX-X和pGEX-E片段(268—333AA)、pGEX-Z和pGEX-G片段表达蛋白(390—494AA)均可发生发生反应。而HCLV阳性血清只与pGEX-E和pGEX-G发生反应因为表达的重组蛋白可被猪瘟阳性血清所识别，表达蛋白可用于基因工程诊断抗原。