豌豆凝集素结合肽的研究

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[目的] 用噬菌体展示技术不仅能够确定抗原决定簇,蛋白水解酶作用的特征序列,以及蛋白质之间的相互作用的位点等等,还可以用来筛选一些非肽分子(特别是糖)的模拟物。而糖与蛋白质的相互作用是许多疾病的病理基础,如能从噬菌体展示随机肽库中筛选到参与某一病理过程的糖的模拟物,将为治疗这类疾病的药物开发提供一条新思路,把较为烦琐、困难的糖类合成简化成已很成熟的多肽合成。 [方法] 1、豌豆凝集素能特异性结合葡萄糖,因此,我们利用Sephedax-G50柱亲和层析分离提纯豌豆凝集素。并对分离提纯的凝集素粉末进行凝血活性实验和SDS-PAGE电泳鉴定。 2、用豌豆凝集素(PSA)作为靶蛋白,对噬菌体展示的随机六肽库进行亲和筛选。 3、将所得22个克隆按序列特征分为3类,从每组中挑选1-2个克隆,进行α-甲基-D-甘露糖苷对噬菌体和PSA结合的抑制实验。 4、选择性地合成了3条6肽ARMWSF、RYDYSY、LRLRQL,用不同浓度的6肽
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