本实验以云南西双版纳产牛至为研究对象,采用水蒸气提取法、微波辅助水蒸气提取法和同时蒸馏萃取法分别提取制备牛至挥发性精油,采用GC-MS对其挥发性成分进行定性定量分析,对不同方法制备精油进行体外抑菌和抗氧化作用研究,并结合不同方法制备精油的组成及相对含量变化进行比较分析,为牛至的开发利用提供相关研究数据。研究结果如下:　　 1.不同提取方法制备牛至精油的GC-MS分析　　 1.1不同提取方法制备精油的提取率与提取效果　　 经过多次重复实验得到水蒸气提取法、SDE提取法和微波辅助水蒸气提取法所得牛至挥发精油得率分别为1.493%、2.064%和1.737%。三种制备方法的得率大小为:SDE提取法＞微波辅助水蒸气提取法＞水蒸气提取法。　　 1.2精油的GC-MS分析结果　　 水蒸气蒸馏法共鉴定出79个峰,相对面积94.97%;SDE法共鉴定出71个峰,相对总面积97.38%;微波辅助水蒸气法共鉴定出40个峰,相对总面积96.84%。三种方法制备精油中含量较多的是醇类和烯烃类,在水蒸气蒸馏法、SDE法和微波辅助水蒸气法这中的相对含量分别为:53.11%和30.93%、55.16%和33.1%、48.73%和35.41%。　　 三种方法制备精油其化学组成中有8种相同的烯烃类和8种相同的醇类物质,但各物质的相对含量不尽相同。烯烃类中相对含量在3%以上的有4种化合物,包括B-水芹烯、1,4-环己二烯、蒈稀和石竹稀,在三种精油中的总含量没有明显差异,表明三种精油制备方法对牛至烯烃类挥发油影响不大。　　 在特有的挥发物质方面,水蒸气蒸馏法含有较多的大分子量烷烃类、醇类和酸类;SDE法有更多的酚类、醛类和酯类物质;微波辅助水蒸气蒸馏法得到了较多的烯烃类物质。　　 2.牛至精油体外抗氧化性的比较研究　　 2.1牛至挥发精油对氧自由基体外清除效果比较分析　　 比较了三种方法制备牛至精油对超氧阴离子、DPPH自由基、羟基自由的清除率大小和IC50值以及还原能力大小,结果显示微波辅助水蒸气提取法制备牛至挥发精油体外抑制自由基的抗氧化效果均优于SDE法和水蒸气蒸馏法。　　 2.2牛至挥发精油体外抗DNA氧化损伤能力的比较分析　　 牛至挥发精油对线性DNA或开环DNA的产生有一定的抑制作用,可以使DNA链大多保持自然螺旋状态从而保护DNA免受损伤,且这种保护效应表现出一定的浓度依赖关系。　　 3.牛至挥发精油体外抑菌作用的比较分析　　 试验菌株的MIC值通过含药平板细胞培养法测定,抑菌圈直径采用牛津杯法,并选取4mg/mL浓度下的抑菌圈直径做敏感度分析。　　 3.1不同方法制备牛至精油对供试菌的抑制作用比较分析　　 根据各菌株MIC值显示,在选取的目标菌株中,牛至挥发精油对大肠杆菌的抑菌效果最好,对黑曲霉的抑菌效果最差。三种方法制备牛至精油对于供试革兰氏阴性菌的抑制效果强于革兰氏阳性菌,对供试酿酒酵母菌的抑制效果强于黑曲霉,其中SDE法和微波辅助法制备精油对酿酒酵母的抑制效果强于水蒸气蒸馏法,　　 根据各菌株的抑茵圈直径大小和4mg/mL浓度下对各抑菌圈的敏感度分析,在所给浓度范围内抑菌效果呈浓度依赖性,在8mg/mL浓度下达最大抑菌圈。三种方法制备牛至精油对大肠杆菌的抑菌效果均优于其他两种菌株,进一步验证了牛至精油对于供试革兰氏阴性菌的抑制效果强于革兰氏阳性菌。三种方法制备牛至精油对真菌的抑制作用不及细菌,其中对酿酒酵母的抑制作用强于黑曲霉。相比之下,SDE法制备精油对真菌的抑制作用略强于另外两种方法。　　 3.2牛至精油与茶树精油对供试菌的抑制作用比较分析　　 根据各菌株MIC值显示,牛至精油与茶树精油对会黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑制效果相当,相同浓度下对供试革兰氏阴性菌的抑制效果强于革兰氏阳性菌;其中,牛至精油对革兰氏阳性枯草芽孢杆菌的抑制效果强于茶树精油。牛至精油和茶树精油对供试真菌的抑制效果不及供试细菌,相同浓度下对酿酒酵母的抑制作用均强于黑曲霉。　　 根据各菌株的抑菌圈直径大小和4mg/mL浓度下对各抑菌圈的敏感度分析可知,在所给浓度范围内抑菌效果呈现浓度依赖性,在8mg/mL浓度下达到最大抑菌圈。牛至精油和茶树精油对大肠杆菌的抑制效果最好,进一步验证了对供试革兰氏阴性菌的抑制效果强于革兰氏阳性菌;其中,同等浓度下牛至精油对枯草芽孢杆菌的抑制效果强于茶树精油。两种精油对酿酒酵母抑菌效果大小相当,但均对黑曲霉的抑制效果较弱,其中牛至精油对黑曲霉的抑菌效果不及茶树精油。