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第一部分:硝普钠对高胆固醇血症兔Odd i括约肌压力的影响
目的:
研究不同浓度的外源性一氧化氮供体硝普钠对高胆固醇血症兔Oddi括约肌压力的影响。
方法:
新西兰兔32只，适应性饲养2周后测血清总胆固醇，将血清总胆固醇＞3mmol/L的兔剔除。随后给予高胆固醇饲料饲养共6周，再次取耳缘静脉血测血清总胆固醇，血清总胆固醇＞10mmol/L为达到高胆固醇血症标准。将动物随机分为4组:对照组，硝普钠终浓度0.1mmol/L组，硝普钠终浓度0.5mmol/L组，硝普钠终浓度1.0mmol/L组，开腹切开十二指肠，逆行插入测压管进行Oddi括约肌测压，经耳缘静脉滴注不同浓度的硝普钠溶液，观察胆总管内压、Oddi括约肌基础压、收缩幅度、收缩频率的变化。
结果:
喂养前兔血清总胆固醇为1.61±0.63mmol/L，高胆固醇饮食喂养6周后，血清总胆固醇为14.20±2.76mmol/L。给药前各组胆总管内压、Oddi括约肌基础压、Oddi括约肌收缩幅度、Oddi括约肌收缩频率无明显差异(p＞0.05)，与给药前相比，0.1 mmol/L、0.5mmol/L、1.0mmol/L的硝普钠可显著降低Oddi括约肌基础压(p＜0.05)，随着硝普钠浓度的升高，Oddi括约肌基础压下降越来越明显(p＜0.05)，1.0mmol/L的硝普钠可降低Oddi括约肌收缩幅度(p＜0.05)。
结论
高胆固醇血症可诱导兔Oddi括约肌功能障碍形成。
0.1mmol/L、0.5mmol/L、1.0mmol/L的硝普钠对高胆固醇血症兔的胆总管内压无明显影响。
0.1mmol/L、0.5mmol/L、1.0mmol/L的硝普钠可降低高胆固醇血症兔的Oddi括约肌基础压，且具有浓度依赖性。
0.1mmol/L、0.5mmol/L的硝普钠对高胆固醇血症兔的Oddi括约肌收缩幅度无明显影响，1.0mmol/L的硝普钠可降低高胆固醇血症兔的Oddi括约肌收缩幅度。0.1 mmol/L、0.5mmol/L、1.0mmol/L的硝普钠对高胆固醇血症兔的Oddi括约肌收缩频率无明显影响。
第二部分:硝普钠对高胆固醇血症兔Oddi括约肌细胞凋亡的影响
目的:
研究不同浓度的外源性一氧化氮供体硝普钠对高胆固醇血症兔Oddi括约肌细胞凋亡的影响。
方法:
新西兰大耳白兔28只，适应性饲养2周后测血清总胆固醇，将血清总胆固醇＞3mmol的兔剔除。随后给予高胆固醇饲料饲养共8周，再次取耳缘静脉血测血清总胆固醇，血清总胆固醇＞10mmol/L为达到高胆固醇血症标准。分离培养Oddi括约肌细胞，用免疫细胞化学染色法进行鉴定，传代培养细胞，选用第3代细胞进行实验，用不同浓度的硝普钠作用细胞24小时，用苏木素-伊红染色、原位末端标记法测定其对括约肌细胞凋亡的影响。
结果:
适应性饲养过程中死亡4只，喂养前兔血清总胆固醇为1.65±0.54mmol/L，高胆固醇饮食喂养8周后，血清总胆固醇为29.17±4.66mmol/。Oddi括约肌细胞分离培养成功，3天传代一次，平滑肌α-肌动蛋白(α-actin)免疫细胞化学染色证实为平滑肌细胞，苏木素-伊红染色显示与对照组相比，硝普钠处理后的Oddi括约肌细胞出现变圆、体积缩小、染色质边集、核固缩等变化，原位末端标记法显示硝普钠处理后的Oddi括约肌细胞收缩变圆，失去正常平滑肌细胞的长梭形形态，呈黄色/棕黄色，凋亡数目较对照组增加。
结论:
0.1mmol/L、0.5mmol/L、1.0mmol/L的硝普钠可诱导高胆固醇血症兔的Oddi括约肌细胞凋亡。